心肌酶谱是对
心肌酶检查，检查心肌酶主要是确定
心肌缺血坏死或
细胞膜通透性。
简介
1.血清酶总论：P232
乳酸脱氢酶（LDH）、谷草转氨酶（AST）、
肌酸激酶（CK）、
肌酸激酶同工酶（CK-
MB），α－HBD COOH COOH
ALP
对－硝基苯酚磷酸盐对－硝基苯酚+磷酸盐
水解
4.
裂解酶类：催化底物移去一个基因而留下双键的反应或逆反应的酶类。
5.异构酶类：催化各种
同分异构体之间互相转化的酶类
磷酸已糖激酶
6.合成酶类（连接酶类）：催化两分子底物合成－分子的化合物，同时必须偶联有
ATP磷酸键断裂。
命名
1.习惯
命名法：根据酶来源，
催化反应性质及底物来命名。
2.
系统命名法：酶反应底物、性质均要列出，各底物间以“：”隔开
（2）反应作用的位置，即可用于哪个基因
1.1 －CH－OH
1.2 －C=0
1.3 －C=CH
1.4 －C=NH
1.5 －CH－NH2
（3）
1.1.1 氯化还原酶 CH－OH 受体：NAD+ NADP-
1.1.2 氯化还原酶 CH－OH 受体：
细胞色素1.1.3 氯化还原酶 CH－OH 受体：分子氧
去路
（一）血清酶的排泄：P234
（四）转入其它体液
活性单位
（一）
酶的活性单位：在
规定条件，每分钟催化1umol的基质发生转化所需要的酶量。
规定条件包括：温度、PH、
缓冲系统、基质浓度及辅助因素
（二）酶的单位计算
1.根据标准计算：
（U/L）
酶活力单位=A样品/A标准×C标准×Vt/Vs×1/t×1000
总体积-样品+基质
酶活力=A样品/ξd×Vt/Vs×1/t×1000
消光系数 比色杯厚度
（三）血清酶的生理差异：
1.性别：男＞女
2.年龄：儿童
磷酸酶＞成人 婴儿 LDH 2倍成人
3.进食：对酶活力本身无影响，但可影响比色时的浊度
4.活动：
改变机制
（一）合成异常：P238
1.合成减少
2.合成增加
（二）酶从损伤细胞中释放增加：
是疾病时大多数血清酶↑的主要机制
（三）其它机制：
2.AST的测定：
一、AST分布：
广泛分布于人体各组织、器官中，主要在心、肝、
骨骼肌、肾、胰、脾、肺、
RBC中。其中以心肌cell含量最丰富。
主要存在
线粒体中（M－AST）。
胞浆中（C－AST）仅占12%，是可溶性的正常血清中AST很少，只有上述
组织发生病变
时，才释放入血。
方法学
（一）赖氏比色法：P1151.原理：
COOH COOH COOH COOH
（CH2）2 + CH2 AST （CH2）2 + CH2
C=O HC-NH2 37℃ HC－NH2 C=0
COOH COOH COOH COOH
COOH CH3
COOH
丙酮酸
CH3
3.注意事项
（1）溶血标本不能用于AST测定，因为RBC中AST是血清10倍。
（2）M－AST、C－AST
理化性质，Ag性均不同，由不同基因控制，但催化相同反应，是同I酶
（3）赖氏比色法简易性，相对
准确性，所以是普及的原因
（4）难以确定在酶反应期内，产物的生成与时间成正比。
草酰乙酸是AST竞争抑制剂，随反应进程，产物，
酶反应不断。
酮戊二酸也可与2.4－
二硝基苯肼反应，产生另一棕色苯腙，使AST测定
假阳性增高。
为了减少其干扰，波长选在490-530nm，此时丙酮酸为－酮戊二酸2倍
2.4－二硝基苯肼在
碱性溶液中也可呈色，使
吸光度伪性增高。
ALT
所以肝疾病AST、ALT同时，使丙酮酸消耗，AST测定结果减低。
B、产物旁路
乳酸
LDH ↑NADH+H+
丙酮酸
↑
α-酮戊二酸+天门冬aa AST
草酰乙酸+谷aa.
所以受LDH、MDH干扰，使AST测定结果减低
1.原理：L－天门冬aa.+α-酮戊二酸 AST 草酰乙酸+谷aa.
草酰乙酸+
NADH+H+ MDH L－苹果酸+NAD+
340nm
吸光度下降值，计算AST活力
2.参考值：男＜40u/L 37℃
女＜35u/L 37℃
3.注意事项：
（1）采血后立即分离血清，避血溶血
（2）血清，室温4-8h，2-6℃ 7d -20℃ 8月 活力不变
（4）AST浓度过高，稀释重做。
（5）不存在偶联转氨作用和产物旁路问题
（6）不存在 酮戊二酸干扰，可适当提高底物浓度使反应完全
α-酮戊二酸+NADH+H++NH3 GLDH 谷aa.+NAD++H2O
消耗NADH+H+，使结果伪性增高。
（8）轿清中丙酮酸LDH
丙酮酸+NADH+H+ LDH 乳酸+HAD+
消耗NDAH+H+，使结果偏高
（9）在指示酶作用有，
草酰乙酸可自动脱羧生成丙酮酸，使结果偏低。应加LDH，使之成为乳酸，从而更加准
确反映AST活力。
所以MDH、LDH共同作为指示酶
三、临床意义：
1.AST在心肌中含量最多，所以在急性心梗时6-12h↑，48h达高峰，3-5d
恢复正常3.急性肝炎，AST，ALT同时↑，可达正常值10-30倍，
黄疸前期就已↑，有助于临床早期诊断。
3.AST同I 酶：
心肌C、肝C出现
实质性损害 M－AST C－AST↑
心梗M－AST↑ 所以M－AST越↑，心梗并发
心衰的发病率、
死亡率越↑，尤其推测死亡率方面意义更大。
有五种同I酶LDH1－LDH5
一、LDH分布和特点：
广泛分布，主要在肾，其次心，骨骼肌，其它肝、脾、胰、肺，上述组织病变，血清中LDH。主要催化以下反应：
L－乳酸+NAD+ 丙酮酸+NADH+H+
PH碱 正反应（L－P）
二、方法学
1.原理：L－乳酸+NAD+ LDH 丙酮酸+NADH+H+
PH8.8
丙酮酸+2.4－
二硝基苯肼 → 丙酮酸－2.4－二硝基苯腙
酸 草黄色
2.参考值：225-540u/dL
（1）标本严禁溶血 因为RBC内LDH活力是血清内的100倍。
（2）LDH受
重金属盐、EDTA、草酸盐的抑制。最好用
血清标本（3）血清标本2-6 数天，室温48h
（4）准确性和
重复性在
酶学检验中最差，因为五种同I酶与底物结合能力不同，最适反应条件不同，在病理
LDH组成差异大，所以很难找出LDH最适反应条件。eg：心梗LDH1↑，肝病LDH5↑
（5）结果＞2500u/dL，将标本稀释重做。
1.原理：L－乳酸+NAD+ PH8.8-9.8 丙酮酸+NADH+H+
逆反应比正
反应速度快2-3倍 所以
反应偏向左侧，多用P－L
LDH
丙酸酸+NADH+H+乳酸+NAD+
PH7.4
340nm处监测，吸光度下降幅度与LDH成正比。
2.参考值：240-460u/L 37℃
3.注意事项：
（1）逆反应优点：
a.试剂用量少，所需NAD+，只是L－P所用NADH+H+的3%，样品少
b.单位时间
内吸光度变化大，逆反应
线性范围较大，
酶促反应速率比正反应快3倍，利于测定。 时间短
（2）正反应优点：
a.NADH+H+比NAD+稳定，价格低，易得到纯品。
底物L－乳酸与逆反应底物丙酮酸稳定
b.L－乳酸对LDH的抑制低于丙酮酸对LDH的抑制
试剂中可加入EDTA，使EDTA络合金属离子，增加NAD+稳定。
（5）NAD+不稳定，产生对LDH有抑制作用的物质。在碱性液中比在酸性液中稳定，在
Tris缓冲液中比在
磷酸盐缓冲液中稳定。
（6）某些
批号的NADH+H+还有LDH的物质，使用前检查NADH+H+质量，NADH+H+溶于Tris缓冲液，分别在
260nm和340nm测吸光度，应2.3，说明含有在260nm处有
吸收峰的杂质，如NAD+、
腺苷。
（7）α－酮丁酸，
羟基丙酮酸、
乙醛酸可代替丙酮酸作底物。
（8）标本不能溶血
三、临床意义：
2.心梗：12-24h，LDH↑，48-72h达高峰，1-2W后恢复正常
3.
恶性肿瘤晚期LDH，恶性肿瘤引起的胸腹水中LDH↑
4.
慢性肾小球肾炎、
SLE、
糖尿病肾病等病人中，尿LDH可达正常人3-6倍，尿中含多种抑制LDH
活性物质，如
尿素，
5.
尿毒症患者LDH正常，透析后LDH↑，因为体内尿素较高