种类
环境诱变剂的种类。一般来说环境诱变剂可以分为3 大类型:物理性环境诱变剂(例如,
电离辐射、紫外线、电磁波等)、化学性环境诱变剂(主要是一些人工合成的化学品,包括药品、农药、
食品添加剂、调味品、化妆品、洗涤剂、塑料、
着色剂、化肥、
化纤等)和生物性环境诱变剂(真菌的
代谢产物、
病毒、
寄生虫等)。除了上面所说的
外源性环境诱变剂之外,还有一些
内源性的环境诱变剂。内源性的环境诱变剂是在
人体健康异常的情况下产生的,如遗传因素、
内分泌紊乱等。在各种不同的环境诱变剂中,最令人不安的是人工合成的化学
物质。
利弊
环境诱变剂的利弊。1927 年,美国遗传学家H.J.Muller 首次利用x 射线成功地诱发了
果蝇突变,开拓了诱发突变的新领域。从此以后,人们利用
诱发突变进行育种工作,取得了极大的成功,并在农学、工业
微生物学、生物学、医学等领域也都取得了巨大的成绩。然而,当时的人们并不明白
环境诱变剂也会对人体产生“三致”(致癌、致畸、
致突变)的严重后果,故人类也为此承受了不少的伤害。在深入研究、积极监测、严加防护的前提下,合理利用环境诱变剂仍然可以造福于人类。例如,随着太空科技的发展,利用太空飞行器搭载作物种子进行“
太空育种”已经操作了一段时间;核能的和平利用,已为人类做出了卓著的贡献;最近我国又计划利用“
核爆炸”实现
藏水北调,将
雅鲁藏布江的
水引到位于
青藏高原东北方向的青海、新疆与甘肃,以改变我国大西北的
生态环境。
潜在危害
环境诱变剂对人体健康的潜在危害。从接触诱变剂到产生有害后果。有时需要很长时间;如果是作用于
生殖细胞的话,那么要在下一代,甚至几代以后才表现出来。例如,长期遭受日光照射的海员、渔民、牧民,在身体暴露处发生
皮肤癌的几率较大,发病期可以在10~40 年以后,平均发病年龄在70 岁以上,开始是色素沉着和角质增生,继之发生
癌变。
抗诱变剂
使
自然突变率或
诱发突变率降低的作用物为
抗诱变剂,是诱变剂的
反义词。据报道,
腺嘌呤、鸟便
嘌呤可作为细菌自然突变的抗诱变剂。抗诱发突变的作用物大致有如下几种:(1)使诱变剂作用降低的作用物(对
X射线引起的突变而言,如预先加上
半胱氨酸等
SH化合物,会使射线产生的
OH、自由基不起作用,而使
突变率降低);(2)给予促进作为突变成因的
DNA损伤(
前突变损伤premutational dam-age)的修复作用物,如在
紫外线照射后用
可见光照射会使突变率降低(
光致活);在突变剂处理后进行非营养性培养(缓冲液等)也会使突变率降低(液体保持致活liquid hilding recovery)。(3)阻碍前突变损伤向突变过渡的作用物[如在紫外线照射后,给咖啡咽(caffeine),会使
哺乳类细胞突率降低]。
化学诱变剂
综述
指引起突变的化学物质。已知的有
烷化剂、
碱基类似物(base analog)、
羟胺(hydroxylamine)、
吖啶色素等。常用
化学诱变剂的种类及作用机制
1烷化剂
是栽培作物
诱发突变的最重要的一类诱变剂。药剂带有一个或多个活泼的烷基。通过烷基置换,取代其它分子的
氢原子磺酸盐和
烷基硫酸盐 代表药剂:
甲基磺酸乙酯(EMS)、
硫酸二乙酯(DES) 2.
亚硝基烷基化合物 代表药剂:亚硝基
乙基脲(NEH)、N-亚硝基-N-乙基脲烷(NEU) 3. 次
乙胺和
环氧乙烷类 代表药剂:
乙烯亚胺(EI) 4. 芥子气类
氮芥类、硫芥类 烷化剂的作用机制--烷化作用 作用重点是
核酸,导致DNA断裂、缺失或修补。
类似物
这类化合物具有与DNA
碱基类似的结构。 代表药剂:
5-溴尿嘧啶(BU)、5-溴去氧
尿核苷(BudR) 为
胸腺嘧啶(T)的类似物 2-氨基嘌呤(AP) 为腺嘌呤(A)的类似物
马来酰肼(MH) 为
尿嘧啶(U)的异构体 作用机制:作为DNA的成份而渗入到
DNA分子中去,使
DNA复制时发生配对错误,从而引起
有机体变异。
3其它诱变剂
亚硝酸 能使
嘌呤或
嘧啶脱氨,改变
核酸结构和性质,造成DNA复制紊乱。HNO2还能造成DNA双链间的交联而引起
遗传效应。
叠氮化钠(NaN3) 是一种
呼吸抑制剂,能引起基因突变,可获得较高的
突变频率,而且无残毒。
物理诱变
物理诱变剂主要有
紫外线,ARTP,X—射线,
γ-射线,
快中子,激光,微波,
离子束等。
1等离子体
常压室温等离子体(Atmospheric and Room Temperature Plasma)的简称,能够在大
气压下产生温度在25-40 °C之间的、具有高活性粒子(包括处于
激发态的
氦原子、
氧原子、
氮原子、
OH自由基等)浓度的
等离子体射流。按照
热力学平衡状态,等离子体可分为三种:完全
热力学平衡等离子体(也称
高温等离子体,其
电子温度(Te)、
离子温度(Ti)和
中性粒子温度(Tn)完全一致),
局部热力学平衡等离子体(也称热等离子体,Te≈Ti≈Tn=3×10~3×10),以及非热力学平衡等离子体(也称
冷等离子体,其Te≥Ti,Ti≈Tn)。
大
气压辉光放电(Atmospheric Pressure Glow Discharge,APGD)是一个被广泛使用的、用来描述大气压条件下各种
气体放电冷等离子体的总称。在各种大气压非平衡放电等离子体源中,采用裸露金属
电极结构的大气压射频辉光放电(Radio Frequency Atmospheric Pressure Glow Discharge,
RF APGD)
等离子体源是近几年提出的一种新的大气压辉光放电冷等离子体源。为了从
生物技术应用的角度突出这种等离子体源的特点,采用常压室温等离子体即ARTP来代表这种RF APGD等离子体源。
科学研究表明,等离子体中的活性粒子作用于微生物,能够使微生物
细胞壁/ 膜的结构及
通透性改变,并引起基因损伤,进而使微生物基因序列及其
代谢网络显著变化,最终导致微生物产生突变。与传统
诱变方法相比,采用ARTP能够有效造成
DNA多样性的损伤,
突变率高,并易获得遗传稳定性良好的
突变株;
2紫外线
我们知道,DNA和
RNA的
嘌呤和
嘧啶有很强的
紫外光吸收能力,最大的
吸收峰在260nm,因此波长260nm的
紫外辐射是最有效的诱变剂.对于紫外线的作用已有多种解释,但研究的比较清楚的一个作用是使
DNA分子形成
嘧啶二聚体,即两个相邻的嘧啶
共价连接,
二聚体出现会减弱双键间氢键的作用,并引起双链结构
扭曲变形,阻碍
碱基间的正常配对,从而有可能引起突变或死亡.另外二聚体的形成,会妨碍
双链的解开,因而影响
DNA的复制和转录.总之紫外辐射可以引起碱基转换、颠换、
移码突变或缺失等。
3γ-射线
γ-射线属于
电离辐射,是
电磁波.一般具有很高的能量,能产生
电离作用,因而能直接或间接地改变
DNA结构.其
直接效应是,
脱氧核糖的碱基发生氧化,或脱氧核糖的
化学键和糖-磷酸相连接的化学键断裂,使得DNA的单链或双链键断裂.其
间接效应是电离辐射使水或
有机分子产生
自由基,这些自由基与细胞中的溶质分子起作用,发生化学变化,作用于DNA分子而引起缺失和损伤.此外,电离辐射还能引起
染色体畸变,发生
染色体断裂,形成染色体结构的缺失、易位和
倒位等。
4激光
激光在微生物
诱变育种方面的
研究与开发应用比较晚。
激光诱变育种技术研究始于20世纪60年代,经过世界各国40多年的开发应用研究,不仅证明激光和普通光在本质上都是电磁波,它们发光的
微观机制都与组成发光物质的原子、分子能量状态和变化密切相关。激光是一种与
自然光不同的辐射光,它具有
能量高度集中、颜色单一、
方向性好、定向性强等特性。激光通过光效应、
热效应和
电磁效应的综合作用,能使生物的
染色体断裂或形成片断,甚至
易位和
基因重组。
5微波
微波辐射属于一种低能
电磁辐射,具有较强
生物效应的
频率范围在300MHz~300GHz,对生物体具有热效应和
非热效应。其热效应是指它能引起生物体局部温度上升,从而引起生理
生化反应;非热效应指在微波作用下,生物体会产生非温度关联的各种生理生化反应。在这两种效应的综合作用下,生物体会产生一系列突变效应。因而,微波也被用于多个领域的诱变育种,如农作物育种、禽兽育种和工业
微生物育种,并取得了一定成果。
6离子束
离子注入是20世纪80年代初兴起的一项高新技术,主要用于
金属材料表面的改性。1986年以来逐渐用于农作物育种,近年来在微生物育种中逐渐引入该技术。离子注入
诱变是利用离子注入设备产生高能离子束(40~60keV)并注入生物体引起遗传物质的永久改变,然后从变异菌株中选育优良菌株的方法。离子束对生物体有
能量沉积(即注入的离子与生物体
大分子发生一系列碰撞并逐步失去能量,而
生物大分子逐步获得能量进而发生键断裂、原子被击出位、生物大分子留下
断键或缺陷的过程)和质量沉积(即注入的离子与生物大分子形成新的分子)
双重作用,从而使生物体产生死亡、自由基间接损伤、
染色体重复、易位、倒位或使DNA分子断裂、
碱基缺失等多种生物学效应。因此,离子注入
诱变可得到较高的突变率,且
突变谱广,
死亡率低,正突变率高,性状稳定。