新生
隐球菌是深部感染真菌中隐球菌属的主要菌种之一,种类较多,广泛分布于
自然界,例如:受动物污染的土壤,检出率较高。在隐球菌属中仅新生隐球菌和格特隐球菌是人类病原菌,可引起肺、脑膜、皮肤、黏膜等部位感染。
新生隐球菌(Cryptoccus neoformans)属于隐球菌属(Cryptococcus),是隐球菌中唯一致病的真菌。新生隐球菌为酵母型真菌,外包一层多糖组成的肥厚荚膜,一般染色法不着色,难以发现,故称为隐球菌。新生隐球菌在自然界分布广泛,鸽粪中最多见。人在免疫力低下时,因吸入鸽粪污染的空气而感染,主要引起肺和脑亚急性或
慢性感染。肺部作为原发病灶,可扩散至脑部感染,引起慢性炎症和脓肿。
新生隐球菌无论在组织内或人工培养条件下均呈现圆形的
酵母样细胞,其外周有一层较厚的胶质样
荚膜,称厚荚膜。菌体直径4-20um,荚膜宽3-5um,菌体内有一个或多个反光颗粒,为核结构。部分菌体可见出芽。临床和环境分离菌株一般为无性期的酵母相生长。1976年Kwon-Chung发现新生变种的有性期,在有性期生长可见菌丝形成。培养诱导实验是观察隐球菌有性期的主要方法。非致病性隐球菌无荚膜。新生隐球菌在沙保培养基和血琼脂培养基上,于25℃和37℃均能生长,非致病性隐球菌则在37℃不能生长。培养数日形成
酵母型菌落,表面黏稠,初为乳白色,后转变成橘黄色。此菌能分解尿素,可与
假丝酵母菌区别。
隐球菌属包括17个种和18个
变种,其中仅新生隐球菌及其变种具有致病性,主要侵犯
中枢神经系统。新生隐球菌系环境腐生菌,广泛生存于
土壤和
鸽粪中。正常人常处于新生隐球菌污染的环境中,但发病者极少。当机体抵抗力降低时,才易侵入人体而致病。由于
肿瘤及
化疗药物的使用、
艾滋病的流行、移植术后
免疫抑制药物的使用等原因,新生
隐球菌的发病率越来越高,在国外已成为艾滋病患者常见的并发症之一,也是导致患者死亡的重要原因。在我国新生
隐球菌的发病率也呈逐年增加的趋势。
新生隐球菌的荚膜多糖是其主要的致病物质,可能与它能抑制机体免疫功能及增加
免疫耐受性有关。动物试验证明,无荚膜的突变株缺乏对小鼠的致病力,恢复产生荚膜能力后则可重获致病力。荚膜多糖能抑制
中性粒细胞的吞噬作用,削弱
T细胞对其产生免疫应答等。
新生隐球菌一般为
外源性感染,大量存在于鸟、鸽粪中。鸽子是重要传染源。主要的入侵途径是
呼吸道,常引起
肺部感染。新生隐球菌也可见于人体正常微生物群中,当机体免疫力低下时可发生
内源性感染,如易发于
白血病,艾滋病及糖尿病患者。新生隐球菌也可以从肺部经血行播散至其他部位,最易侵犯
中枢神经系统,主要引起脑膜的亚急性和慢性感染,死亡率高,尚可播散至皮肤、黏膜、骨和内脏器官等。
新生隐球菌为圆形或卵圆形直径为2~20pm,大小不均,革兰染色阳性,为紫色出芽或未出芽孢子无真、假菌丝。标本直接涂片,孢子革兰染色不均,内有颗粒,中央有凹陷;新生隐球菌具有宽厚荚膜,墨汁负染,可见圆形或卵圆形透明细胞,芽颈极细,注意与皮炎芽生菌相区分,内含脂质颗粒,胞壁完整,有草黄色折光性;抗酸染色,孢子染为蓝色,大小不一,出芽或未出芽,中央凹陷,像压扁的乒乓球;瑞-吉染色,孢子染为蓝色,着色浅,出芽或未出芽,可见未着色荚膜;六胺银染色,清晰可见未着色的荚膜。
1、直接镜检墨汁染色涂片镜检是常用的简便方法。脑脊液标本离心后取沉淀、
痰和
脓标本则可直接检查。染色后镜检,见有圆形或椭圆形的菌体,其外有宽厚的荚膜即可做出诊断。
2、
分离培养用沙保培养基,于30℃左右培养最为适宜,2-5d即可形成典型的隐球菌菌落。从菌落取菌镜检,可见到圆形或椭圆形菌体,无假菌丝形成。