在一般培养温度下呈固体状态的培养基都称固体培养基。在液体
培养基中加入1.5%~2.0%左右的
琼脂,加热至100℃溶解,40℃下冷却并凝固,使其成为固体状态即为
固体培养基。
固体培养基可以分为两类:一类是用天然的固体状物质制成的,如用马铃薯块、
麸皮、
米糠、豆饼粉、
花生饼粉制成的培养基,酒精厂、酿造厂等常用这种培养基;另一类是在液体中添加
凝固剂而制成的,如实验室中常用的
琼脂固体斜面和固体
平板培养基。这种培养基广泛用于微生物的分离、鉴定、保藏、计数及
菌落特征的观察等。
固体培养基的
凝固剂一般不是微生物的营养成分,只起
固化作用。理想的凝固剂应具备以下条件:不会被微生物分解利用;不会因高温灭菌而受到破坏;在微生物生长的温度范围内保持固体状态;对微生物及操作人员均无毒害作用;透明度好、凝固力强;价格低廉,配制方便。常用的凝固剂是
琼脂。琼脂的主要成分是硫酸
半乳聚糖,绝大多数微生物都不能分解利用它。琼脂的熔点为96℃,凝固点为40℃,因此,在一般的培养条件下都呈固体状态,而且透明度强。正是这些优良特性,使琼脂取代了早期使用的明胶而成为常用的凝固剂。
呈液体状态的培养基,叫
液体培养基或培养液,发酵液。
液体培养基因营养物质分布均匀,与菌体表面接触充分,还能大量溶解微生物的代谢产物等优点,广泛用于微生物的生理、代谢研究以及大规模的工业化生产中。
理想的凝固剂应具备以下条件:①不被所培养的微生物分解利用;②在微生物生长的温度范围内保持固体状态,在培养
嗜热细菌时,由于高温容易引起培养基液化,通常在培养基中适当增加凝固剂来解决这一问题;③凝固剂
凝固点温度不能太低,否则将不利于微生物的生长;④凝固剂对所培养的微生物无毒害作用;⑤凝固剂在灭菌过程中不会被破坏;⑥透明度好,粘着力强;⑦配制方便且价格低廉。实验用的
凝固剂有
琼脂、明胶和硅胶,后者用于配制
自养微生物的固体培养基。对其他多数微生物来讲,以琼脂最为合适,一般加入1.5—2.5%即可凝固成固体。此培养基可供分离、鉴定、
活菌计数、
菌种保藏等用。