己糖激酶法
化学术语
己糖激酶是六碳糖的磷酸化酶,催化使葡萄糖稳定状态变为活跃状态,活化一个葡萄糖需要消耗1个ATP,一个ATP放出一个高能磷酸键,大约放出30.5kj自由能,大部分变为热量而散失,小部分使磷酸与葡萄糖结合生成葡萄糖-6-磷酸。
过程
酶馄合试剂的成分与浓度
根据试剂盒说明书复溶后,混合配制成酶试剂,置棕色瓶中放冰箱保存,约可稳定7天。
2.5mmol/L葡萄糖标准应用液
1.速率法测定(以半自动分析仪为例)
(1)主要参数 (2)加样;37℃预温酶混合试剂1000μ1,加血清20μ1,立即吸入自动分析仪,监测吸光度升高速率(△A/min)。
(3)计算
2.终点法测定:取16mmXl00mm试管,按下表编号与操作。
以上各管充分混匀,在37℃水浴,准确放置10min,分光光度计波长340nm、比色杯光径10mm,用蒸馏水调零,分别读取各管吸光度(Au、Ac、As、AB)。
计 算
空腹血清葡萄糖为3.89—6.1lmmol/L(70一110mg/dl)。
附注
1.己糖激酶方法的特异性葡萄糖氧化酶法高,是公认为测定血糖的参考方法,适用于自动分析仪。轻度溶血、脂血、黄疽、维生素C氟化钠、肝京、EDTA草酸盐等不干扰本法测定.因为从红细胞释放出的有机磷酸酯和一些酶能消耗NADP,故干扰本法测定。
2.虽然根据NADPH摩尔吸光度可以直接计算血清葡萄糖浓度(如Boehringer、Roche等试剂盒),但建议最好同时测定标准管和空白管(蒸馏水代替血清)。此时计算公式应为:
参考资料
最新修订时间:2024-05-21 11:27
目录
概述
过程
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