土屋昌次（1545-1575）是金丸筑前守虎义的次子，幼名平八郎，
武田信玄的“奥近习六人众”之一，武田家年轻一代里的猛将，对
野战和城战都出众的才能。
土屋昌次是金丸筑前守虎义的次子，幼名平八郎，
武田信玄的“奥近习六人众”之一。所谓六人众指的是土屋昌次、
三枝守友、武藤喜兵卫（即
真田昌幸）、
甘利昌忠、
曾根昌世和三枝新十郎。
土屋昌次的初阵就是第四次
川中岛合战，当时他年仅十七岁。在这场战役中，他表现异常活跃，负责守卫信玄的本阵，毫无惊慌失措，在上杉军的猛攻之下，始终不曾后退过一步，他的武勇连信玄也为之感慨。这场战役之后，昌次因功被信玄要求继承
武田氏的名族土屋氏并正式改名为土屋昌次。
土屋昌次是信玄近侍出身，对信玄十分忠诚。在信玄病死之后，曾意欲殉死追随信玄公而去，但是为弾正忠正
高坂昌信所劝。
长篠合战中，土屋昌次和
穴山信君、
马场信房、
真田信纲、
真田昌辉、
一条信龙率领三千骑兵的武田军右翼队。面对
织田信长的三千支铁炮，昌次所在的部队虽然突破了第二道防马栅，但还是被铁炮挡在了最后一道防马栅之后。5月21日下午1时，昌次在随
山县昌景一起突破马防栅冲锋攻击时，两人均遭铁炮击中身亡，昌次时年仅三十二岁。