核内不均一RNA,在真核细胞的细胞核内可以分离出一类含量很高,分子量很大但不稳定的
RNA,称为核内不均一RNA(heterogeneous nuclear RNA,hnRNA),其平均分子长度为8-10Kb,长度变化的范围从2Kb左右到14Kb左右,比
mRNA的
平均长度(1.8-2Kb)要大4-5倍。
(1) hn
RNA和mRNA有相同的序列。用小鼠核内hnRNA分离出的1.5Kb(15S)的RNA分子和
10Sβ-珠蛋白mRNA分别与小鼠的b-
珠蛋白基因都可进行
分子杂交,形成
R环。实验结果表明hnRNA中存在与mRNA相同的序列,但比mRNA更为复杂。此是hnRNA是mRNA前体的最有力的证据。
(2) hnRNA在体外能作为模板翻译蛋白,这也是hnRNA的mRNA前体的
直接证据;
(3) 两者5′端都有
帽子结构,其它的RNA分子(除成熟的snRNA)和前体都没有这种特殊的结构。
根据以上证据表明:hnRNA和mRNA之间关系密切,不说全部的hnRNA,至少是部分hnRNA是mRNA的前体。但由于它已有5′帽结构和3′poly(A)尾巴,所以它不可能是
初始转录本,而已经通过初步的加工。在上述的分子杂交中可以观察到β-
珠蛋白的15S RNA与
DNA杂交形成的环是完全互补的,而10S RNA与
DNA的杂交DNA出现了
双链的环,这表明15S RNA尚未切除
内含子,和DNA一样,所以可完全互补,而10S RNA是已切除内含子的mRNA,它和DNA杂交时可使内含子区域环出。由此可见hnRNA虽已
加帽,加尾,但尚未切除内含子。采用Berk和Sharp
作图法也可证实
免疫球蛋白轻链前体上含有
间插序列。