链霉
亲和素(streptavidin下称SA)是与亲和素(avidin下称AV)有相似生物学特性的一种
蛋白质,是streptomyces avidinii菌的分泌物,其分子量及结合
生物素的能力与
鸡蛋清中的亲和素相似,
等电点6.0,
非特异性结合远比亲和素低。
SA 是Streptomyces avicllrdi菌培养过程中的分泌产物,主要通过2一亚
氨基生物素亲和
层析法提纯,1L
培养液中含蛋白10~60mg 。
链霉亲和素是
四聚体蛋白,大小为66KDa。一分子链霉亲和素可以高度
特异性地与
四分子生物素结合,两者之间的亲和力极为强烈,链霉亲和素-生物素复合物的解离常数处于 10-14 mol/L 数量级,这一性质常用于
分子生物学用途。其中一条完整的SA肽链中有159个
氨基酸残基,分子量为16450。
消光系数与蛋白中
Tyr含量有关, 由于SA 中Tyr的
含量比AV 多,所以SA的
比消光系数也较AV 为高,两者分别为E 1mg/mL=3.40和E1mg/mL=1.57。在282nm 上这两种
蛋白结合生物素后并不改变其消光系数,而在233nm上,它们结合生物素后郡便其消光系数值增高,一般都是利用蛋白的这种吸光特点来测定它们的活性。
链霉亲和素分子由4条相同的
肽链组成,其
氨基酸组成中,
甘氨酸和
丙氨酸的含量较大,而且结合生物素的活性基团也是肽链中的
色氨酸残基;链霉亲和素是一种稍偏酸性(pH6.0)的蛋白质,并且不带任何
糖基。在
蛋白水解酶作用下,链霉亲和素可在
N端10~12和
C端19-21间断裂,形成的核心链霉亲和素仍然保持完整的结合生物素的能力。链霉亲和素的活性单位也是以结合1μg生物素所需的量来表示,1mg链霉亲和素的最高活性可达18U。