丝状真菌里氏木霉(Trichodermareesei)是
多细胞的
真核微生物,红褐肉座菌(Hypocrea jecorina)的无性型,隶属于
丛梗孢目(Moniliales)
木霉属(Trichoderma)。其作为工业菌株用于生产分解不同植物材料的酶类,包括
纤维素酶、
半纤维素酶、蛋白酶、淀粉酶等,已有多年历史。
菌落呈广铺的棉絮状,起初为白色致密的平坦菌丝,而后边缘出现浅绿的产
孢子丛束区,反面无色。
分生孢子梗菌丝的短侧枝,透明,多分枝;小梗瓶形,中部弯曲;
分生孢子椭圆形或长形,单细胞,透明,无色,壁光滑,成堆时绿色。
里氏木霉所产生的一种主要的
纤维酶一纤维二糖水解酶I(cellobiohydrolase1),由
单拷贝基因编码,其产量可达里氏木霉胞外
分泌性蛋白总量的50%[1]。由此可见,cbh1
启动子是很强的启动子。因此在对里氏木霉的遗传改造中,常利用cbh1的启动子与
终止子序列构建载体,并利用cbh1的
前导肽序列引导
重组蛋白进行分泌性表达。里氏木霉具有合成蛋白和
分泌蛋白的能力;并具有真核的分泌机制,很可能还具有与哺乳动物系统相似的蛋白修饰性能,如:高
甘露糖型和
N-糖基化[2]等。由于里氏木霉具有以上优良性能,再加之其工业化规模发酵条件已比较成熟,这些都促进了对里氏木霉的遗传改造,为同源或异源
分泌性蛋白的产生提供了一条行之有效的途径。
里氏木霉不仅具有适于蛋白生产的诸多优点,且对人没有毒性,在产酶条件下也不产生
真菌毒素和抗生素。近年来的实践表明,经过基因工程手术改造的里氏木霉重组菌株是安全无害的。