deuterium exchange method是指离子交换法 一般用于蛋白质结构检测 一般用于测α-螺旋
简介
是指
离子交换法 一般用于
蛋白质结构检测 一般用于测α-螺旋
H/D Exchange Method
Pulsed-Amide H/D Exchange Method
1.Pulsed-Amide H/D Exchange Method
蛋白质骨架上面的质子在未被保护的情况下（暴露在溶剂环境中，不受自身其他氧、氮原子中的孤对电子的影响）会与重水中的氘发生质子交换。
＞N-H + D2O f＞N-H + DOH
蛋白处在开折叠得状态时，发生氕氘交换，之后检测蛋白重新折叠起来的动力学过程。
对于大多数蛋白而言，两端的helices骨架上的60%质子在前20ms的时间内形成折叠，而剩下的40%的质子在接下来的100ms和10s内形成折叠。
实验过程
（A）在蛋白样品中加入变性剂，使得蛋白处在开折叠的状态下，并且使得蛋白中的全部质子交换成氘pD6.0（时间需要3s以上）；
（B）在上述的样品中加入H2O（pH6.0可以是酸性溶剂），稀释变性剂浓度，使得蛋白样品开始重新折叠。
（C）加入H2O碱性溶剂pH 9.0，此时质子交换时间在1ms以内。
（D）当蛋白重新折叠完之后，用NMR或者MS检测蛋白结构