电压钳(voltage clamp)技术是通过插入细胞内的一根微电极向胞内补充电流,补充的电流量正好等于跨膜流出的反向离子流,这样即使膜通透性发生改变时,也能控制膜电位数值不变。
经过离子通道的离子流与经微电极施加的电流方向相反,数量相等。因之可以定量测定细胞兴奋时的离子电流。膜通透性的改变是迅速的,但如使用一个高频响应的放大器,可以连续、快速、自动地调整注入电流,达到保持膜电位恒定的目的。它可以测量细胞的膜电位、膜电流和
突触后电位。
根据不同的实验标本,可采用双微电极电压钳、空间钳位或单根吸附电极电压钳。在双微电极电压钳法中,一根胞内电极与测定膜电位的跟随器电路以及一个反馈
电压放大器相连接,记录电压及控制膜电位;另一根
细胞内电极用于向胞内注射来自反馈放大器输出的电流。当纪录电极输出的电压与反馈放大器标定的钳位电压不相等时,反馈放大器就会通过注射电极向胞内注入电流,直至二者相等为止。这是不再有电流注入细胞,此时通过浴槽地电极的电流—电压转换放大器纪录变化的膜电流。由于注入的电流正是用于减小差值信号的电流,所以这种电路是一种负反馈电路。双微电极钳位法适用于巨大的神经轴突、肌肉纤维和较大的细胞等。对一些细胞的电压钳位,可以通过天然的细胞解剖结构或实验者自己设计的间隙(糖间隙、油间隙)隔膜、屏障来完成,称之为空间钳位,即在细胞立体空间上保持均一的膜电位。对于较小的细胞(直径10um左右),插入两根胞内电极很困难,这是可使用单根吸附电极进行电压钳位。