游离酸，又名3,3,5,5-四甲基联苯胺，熔点168-171°C，主要用于作为过氧化氢酶底物用在ELISA 反应中，该底物能产生可溶性淡蓝色的末端产物。

CAS号：54827-17-7

分子式：C16H20N2； [-C6H2(CH3)2-4-NH2]2

别名：3,3,5,5-四甲基联苯胺

别名英文名：3,3,5,5-Tetramethylbenzidine

TMB作为过氧化氢酶底物用在ELISA 反应中，该底物能产生可溶性淡蓝色的末端产物，能在370 或 620-650 nm用分光光度计读取。TMB反应可以用2 M H2SO4 (产生黄色)终止, 并能在450 nm读取。因此TMB是测定血液、检测血红素（hemoglobin）和过氧化物酶的灵敏和特定试剂。

熔点：168-171 °C

密封保存

TMB已在逐步取代强致癌物联苯胺和其他致癌性的联苯胺衍生物，应用于临床化验、法医检验、刑事侦破及环境监测等领域。尤其是在临床生化检验方面，TMB作为过氧化酶的新底物，在酶免疫分析法（EIA）和酶联免疫吸附检验法（ELISA）中获得了广泛的应用。

(一)，TMB的主要应用项目如下：

1.指纹检测,是目前公安上显现潜血手印的最有效的方法

2.唾液中酒精的快速检测

3.尿联试纸的配制

4.肝炎病毒检测

5.妊娠检测试验

6.血液和尿液中葡萄糖、血红蛋白、白蛋白的快速测定

7.粪便隐血试验

8.血液中粒细胞值的测定

9.类固醇、性激素的检测

10.酶活性的测定

11.抗原、抗体及遗传物质的分析、检测

12.生物样品的染色

13.水质检测

14、测定商品中偶氮染料释放的芳香胺的标准