末端转移酶(terminal deoxynucleotidyl transferase,TdT)是一种无需模板的
DNA聚合酶,催化
脱氧核苷酸结合到
DNA分子的3'羟基端。
【性状】
悬浮液,
重组酶。末端转移酶(
Terminal transferase,TdT)是一种无需模板的
DNA聚合酶,催化脱氧核苷酸结合到DNA分子的3'羟基端。带有突出、凹陷或平滑末端的单
双链DNA分子均可作为TdT的底物。一般操作是:先在载体上打开一单个位点,把它与末端转移酶和某一
dNTP(如dATP)一起保温以使
添尾,另一待插入的
外源DNA片段则用互补的用同法添dNTP(
dTTP)用同法添尾。接着使上述两种都接上互补单链尾的DNA片段彼此退火,使形成一杂合载体来转化
受体菌。杂合载体中的裂隙或切口可被受体菌所修复。随酶提供10×反应
缓冲液和25mMCoCl2