放射自显影法
利用照相乳胶或特殊的核乳胶记录、检查和测量放射性示踪剂的分布、定位和定量的方法
放射自显影法是一种利用照相乳胶(感光材料)或特殊的核乳胶记录、检查和测量放射性示踪剂的分布、定位和定量的方法。包括宏观自显影、微观自显影、电镜自显影三类。
介绍
利用照相乳胶检查、测量和记录样品中放射性物质的方法。将带有放射性物质的样品(切片等)与照像乳胶紧贴在一起,样品中的放射性核素放出的射线使照相乳胶感光,形成潜影,经过显影、定影处理,得到与样品中放射性物质的分布相一致的图像。然后根据照片中银颗粒的部位和数量对样品中的放射性物质进行定位和定量。
分类
放射自显影根据研究对象大小不同分为三种:
①宏观放射自显影,适于整体植株、小动物或动植物的器官,一般用X光片,能在一张自显影片上显示整体或器官中放射性物质的分布和积累情况,多用视觉感管直接观察感光密度计测定黑度。
②光镜放射自显影,适于生物组织切片,自显影片用光学显微镜观察,可以分析研究放射性物质在组织细胞中的分布和积累情况,又称组织学放射自显影。
③电镜放射自显影,样品需超薄切片等特殊制备,自显影片用电子显微镜观察,有极高的分辨率,能显示普通光学显微镜所不能察知的细微结构与自显影颗粒的相互关系,可以确定放射性标记物质在亚细胞水平乃至分子水平上的分布、积累和定位。
制作放射自显影的基本过程
生物材料的标记→自显影样品的制备→自显影的制作→曝光→显影→定影→观察与分析(定位及放射性测量)
放射自显影的特点
ARG既是一种辐射探测方法,又是一项完整的同位素示踪技术。它与一般用制备的放射性样品,通过电离或闪烁探测器检测放射性的示踪技术相比,有下列主要优缺点:
优点
1、能够准确定位 依自显影的类型不同能检测放射性物质在器官、组织、亚细胞结构、甚至在生物大分子中的分布。至于用自显影获得的细胞,亚细胞和分子水平上放射性物质的分布是用一般的生物化学分离法难以获得或不能获得的。
2、具有很高的灵敏性 因为照相乳胶对射线的反应具有累积作用,所以通过延长曝光时间可以检测到样品中微弱放射性。
3、资料形象,易于保存 获得的自显影图像能清晰反映放射性物质在器官、组织、和各结构部位的分布情况,形象、客观并能长期保存。
缺点
1、自显影的制备时间过长 手续较复杂,尤其显微自显影要求较薄的技术;
2、不能直接定量 一般情况下只能相对定量。因此,除了在细胞学、分子生物学和遗传学研究中的特殊目的外,在一般的示踪实验中,放射自显影作为放射性检测的一种手段,补充提供放射性物质的吸收,运转和分布的资料。
参考资料
最新修订时间:2022-08-25 13:20
目录
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