复制子(replicon):是
DNA复制时从一个
DNA复制起点开始,最终由这个起点起始的
复制叉完成的片段。DNA 中能独立进行复制的单位称为复制子。每个复制子使用一次,并且在每个
细胞周期中只有一次。复制子中含有复制需要的
控制元件。在复制的
起始位点具有原点,在复制的终止位点具有终点。
假说
提出
F.Jacob等在1963年提出的有关染色体复制
调节机制活动的假说。他们把
自主复制的单位称复制子,例如
大肠杆菌的
DNA,其本身是一个复制子,
附加体和质粒也是复制子。该假说假定每个复制子有称为复制基因的结构部分,以及称为
起始因子的产生于细胞质性物质的基因。例如,大肠杆菌的DNA生成对大肠杆菌特异的起始因子,它只作用于大肠杆菌的
复制基因,从此开始复制。
F因子也是如此,例如当F因子整合进入大肠杆菌染色体而成为
Hfr状态时,F因子DNA便作为大肠杆菌复制子的一部分进行复制。此外,高等生物的染色体可认为是许多复制子纵向连接而成的。在复制子学说中,假定
正调节起主导作用,这与转录的调节中
负调节起核心作用的情况是相反的。
原核生物
原核生物一般来说只有一个
复制起点,整个DNA都由这个起点开始的
复制叉完成,所以它们的DNA是“单复制子”的。
真核细胞是多个复制起点,每个起点开始各自完成一个片段最终相连完成整体复制,所以是“
多复制子”的。
结构信息
很多实验都证明:复制是从
DNA分子上的特定部位开始的,这一部位叫做复制起始点(origin of replication)常用ori或o表示。细胞中的
DNA复制一经开始就会
连续复制下去,直至完成细胞中全部基因组DNA的复制。DNA复制从起始点开始直到终点为止,每个这样的DNA单位称为复制子或复制单元(replicon)。在
原核细胞中,每个
DNA分子只有一个复制起始点,因而只有一个复制子,而在
真核生物中,DNA的复制是从许多起始点同时开始的,所以每个DNA分子上有许多个复制子。每个复制子都含有一个
复制起点。
原核生物的
染色体和质粒、真核生物的
细胞器DNA都是环状
双链分子,它们都是单复制子,都在一个固定的起点开始复制,复制方向大多数是双向的,少数是
单向复制。多数是对称复制,少数是不对称复制(一条链复制后才进行另一条链的复制)。
原核基因组中只含有一个复制子,所以复制的单位就是分离的单位。
细菌染色体本身就是最大的复制子。在原点起始就会引起整个
基因组的复制,这个过程在每次分裂中发生一次。每个
单倍体细菌都只有一个染色体,这种复制的控制称为单拷贝。
细菌可能会在
质粒中含有其他的
遗传信息。质粒(Plasmid)是包括独立复制子的
环状DNA 基因组。一个
质粒复制子可能同基因组一起复制(单拷贝复制)或受到另一种调控。当质粒的
拷贝数多于细菌染色体数时,复制受多拷贝控制。每个
噬菌体或
病毒DNA 也都含有一个复制子,能在一个感染循环中引发多次复制。所以可能一个更好的看待
原核生物复制子的方法就是改变它的定义:任何包括复制原点的
DNA分子都能在细胞中自主复制。细菌和
真核生物基因组在其组织形式上的一个主要区别体现在它们的
复制中。每个真核生物的染色体都包括很多复制子。所以在染色体上分开的DNA 包括许多复制的单位。这就为复制的控制增加了负担。所有处在同一个染色体上的复制子在一个
细胞周期中都会被复制,虽然它们不是同时被激活的,而是在一个相当长的时期内被激活的。然而这些复制子中的每一个都必须在这一细胞周期中只被激活一次。必须有信号来区别已复制的复制子和未复制的复制子,使复制子不被多次复制。由于许多复制子都被独立的激活,所以还需要另外的信号来证明所有的复制子已完成了复制过程。
基因组
为了正确的遗传,一个细菌复制子需要以下功能:1、起始复制的过程。2、控制起始的频率。3、将复制的染色体分到
子细胞中去。前两种功能都是原点来行使。分配可能是一种独立的功能,但在
原核系统中通常与邻近原点的序列有关。
真核生物的原点不行使分配的功能,它只与复制有关。
根据一个普遍的规律,含有原点的
DNA序列可通过它能使与之连接的
DNA复制的能力来分离。当把含有原点的DNA 克隆到无原点的分子中时,就会产生一个能够自主复制的质粒,好像原点的DNA 包括识别自主
复制原点所需要的所有序列。
在细菌、酵母、
叶绿体和
线粒体中都鉴定出原点,但在高等生物中尚未鉴定。原点的共同的特点是整体A-T 含量很高。推测这可能与DNA 复制起始时解链需要有关。E. coli
基因组的复制以双向方式从一个原点oriC 开始。将oriC 与任意一段
DNA序列连接都能使其在E. coli 复制。通过减少oriC
克隆片段大小的方法检测出起始复制所需的序列为一个245bp 的片段。
原核复制子通常是
环状的——DNA 形成一个没有游离端的闭合环状结构。环状结构包括
细菌染色体本身、所有的
质粒和许多
噬菌体。这种情况在线立体和
叶绿体DNA中也很常见。环状分子的复制避免了线形分子末端无法复制的问题,但却引起了如何结束复制的问题。
细菌染色体以一个复制单位从oriC 开始
双向复制。在oriC上形成两个
复制叉,并延伸到整个
基因组(以大致相同的速度)。终止发生在不同的位置。
多复制子
在
真核细胞中,DNA复制只是
细胞周期的一部分。
S期是
分裂间期的一部分,通常在高等真核细胞中持续数小时。真核染色体中所包含的大量DNA 分为许多复制子复制。只有很少的复制子可以在S期的任何时间复制。尽管没有充足的证据但很可能每个复制子在S 期的特定时间被激活。第一个复制子的激活标志着S期的开始。在接下来的几个小时里,其余的复制子相继发生起始。
原点分离
每段含有复制原点的DNA 都应该能够复制。所以尽管在
真核生物中
质粒很罕见,但可通过合适的方法在体外构建。这种方法虽然在高等真核生物中未实现但在酵母中已经成功。
酿酒酵母中的突变能通过导入野生型基因的DNA“转化”为野生型。有些酵母的DNA片段(当环化后)能够高效的转化缺陷细胞。这些片段能以
不整合(自主)状态存在,即作为自主复制的质粒存在。一种高频转化片段包含能使其在酵母中复制能力的序列。这种序列称为
自主复制序列(ARS)。ARS元件属于复制原点;复制在ARS元件在染色体所处的位置上起始。具有ARS 功能的序列出现的频率与复制原点出现的平均频率大致相同。对染色体区域上的ARS元件定位发现,事实上似乎只有一部分用来起始复制。其余ARS是沉默的,或很可能偶尔被用到。如果一些区域确实可能用不到,那么在复制子之间可能不存在固定的终点
有关问题
相关问题
1、这一问题可以通过将线形复制子转变为环状或多分子解决,噬菌体如
T4 和使用这种机制DNA 可能形成特殊的结构——例如在末端形成
发夹,使分子中没有游离末端。
2、
草履虫(Paramecium)中线粒体的线形DNA 是通过形成交联来完成复制的。
3、有些情况下,可能复制后末端会发生变化。真核生物的染色体可能u28857 采取这种形式,复制后DNA 末端相同单位的
拷贝数变化。增加或减少单位的机制不再需要从末端开始复制。
4、某些
蛋白质可能会协助从线形末端的起始。几种线形的
核酸具有与5'端
碱基共价结合的蛋白质。了解最清楚的例子是
腺病毒(Adenovirus)DNA,
噬菌体Φ29DNA和
脊髓灰质炎病毒(Poliovirus)
RNA。一个在线形末端起始的例子是腺病毒和噬菌体Φ29的DNA,这些DNA确实是在末端起始复制,相同的事件能独立的发生在任一端。一条新链从一个末端起始合成,代替原来相同的链。当
复制叉到达分子的另一端时,被代替的链被释放。接着它被独立的复制;这需要在分子末端一些短的
互补序列形成
双链区。