焦碳酸二乙酯是一种强烈但不彻底的
RNA酶抑制剂,分子式为C6H10O5,分子量为162.14。通过和
RNA酶的活性
基团组氨酸的
咪唑环结合使
蛋白质变性,从而抑制酶的活性,常用于
生物实验中RNA的提取等。
Diethyl oxydiformate; Ethoxyformic anhydride; Pyrocarbonic acid diethyl ester; Diethyl dicarbonate; DEP
DEPC是RNA酶的化学修饰剂,它和RNA酶的活性基团
组氨酸的
咪唑环反应而抑制酶活性。DEPC与
氨水溶液混合会产生致癌物,因而使用时需小心。
DEPC能与
胺和
巯基反应,因而含
Tris和DTT的试剂不能用DEPC处理。
DEPC是一种有效的核酸
酶抑制剂,它能够与很多酶的-NH,-SH或-OH等基团发生反应,从而破坏酶的
活性中心。DEPC溶液浓度约为0.1% (v/v)时可使RNase失活,从而防止RNA被降解。在进行RNA实验时,常用DEPC处理实验所用的各种试剂。
我们通常所说的DEPC(处理)水是指用DEPC处理过并经高温高压消毒的超纯水。超纯水加0.1% DEPC,混匀过夜,121℃,20min。而后DEPC即降解成
二氧化碳和酒精,失去毒性。
DEPC(处理)水可以用于RNA沉淀的溶解,含有RNA的各种反应体系如
反转录、siRNA的退火等,以及其它各种要求无
RNase、
DNase和proteinase的反应体系。