雄烯二酮的生物活性介于雄性激素很弱的去氢表雄酮和活性很强的雄性激素睾酮之间。雄烯二酮也有激素原的特性，既表现出雄激素的性质，也具备睾酮的雌激素特性。排卵期女性的
卵巢均分泌雄烯二酮，
绝经后的妇女分泌较少，成年男性的雄烯二酮浓度较同龄女性略低。正常妇女雄烯二酮的分泌量为
睾酮的10倍。主要用于诊断裂链酶缺乏症。
裂链酶缺乏，脱氧异雄酮、睾酮、雄烯二酮、
雌二醇均甚低，雄激素不足，男性出现假两性畸形，男性性发育延迟，性腺发育不全；女性表现为原发性闭经、性不发育。女性外阴硬化性苔藓样增生、肾上腺或卵巢的男性化肿瘤，镰状细胞贫血等血浆中雄烯二酮含量降低。
血清雄烯二酮的浓度升高可见于男性化的新生儿和儿童，以及无男性化的迟发型成年女性，如女性多毛症，女性男性化疾病，先天性肾上腺皮质增生。多囊卵巢综合征、卵泡膜细胞增殖症可轻度增高或正常。