野生株
基因:用M13mp18/gD2和M13mp19/gD2野生株重组噬菌体上清转 染TG1制备单链
模板,从两个方向测定野生株gD基因序列。在
复旦大学遗传所ABI373A自动测 序仪上进行测定,综合测序结果即得到HSV-2野生株gD基因序列
全世界人口中70%的人
血清疱疹病毒抗体阳性,超过三分之一的人有复发性H SV
感染。本例患者(野生株)有5年
生殖器疱疹的复发病史,经多种
抗病毒药物治疗无效。分 析其核苷酸序列发现HSV-2野生株gD基因片段第235bp和第474bp处发生了T-C、C-T的有意 义突变。gD基因编码的氨基酸序列有两个变异,在第80位V(赖氨酸)-A(丙氨酸),第159位I (
异亮氨酸)-T(苏氨酸)有变异。该病例反复发作,久治不愈,考虑与其gD基因的核苷酸和 氨基酸突变有关。有待更多的复发性HSV-2gD
基因序列做进一步的证实和探讨。
利用
合成的引物,以HSV-2野 生株及标准株DNA为模板,通过PCR扩增gD基因,得到了含646基因片段的PCR产物,其大小与 预期值相符,未发现非
特异性条带。根据已发表的HSV-2G株gD基因中含有SalⅠ
酶切位点, 将扩增的HSV-2野生株及HSV-2 Sav株用SalⅠ酶切分别得到264bp和464bp的酶切产物。野 生株酶切片段与标准株相符(图1)。