双抗体夹心酶联免疫检测方法是将抗体吸附于固相表面，加抗原，形成抗原一抗体复合物，再加酶标抗体，最后加底物，根据底物的降解量确定抗原有无及数量。

酶联免疫检测(ELISA)是常见的抗体或抗原测定方法。ELISA是基于相关联的酶对那些免疫复合物发生酶催化反应进行测定的。抗体可以固定在一个有表面涂层的塑料板上，因此经简单洗涤这块塑料板，免疫复合物就易于与其他组分分开，而进行测定。

酶联免疫检测法(PSTVd除外)全过程包括病毒抗原的分离与纯化、病毒抗血清的制备和抗血清反应3个环节。抗血清反应实验步骤包括：抗原吸附在固相载体上，加待测抗体，再加相应酶标记抗体，生成抗原一待测抗体一酶标记抗体的复合物，再与该酶的底物反应生成有色产物。借助分光光度计的光吸收计算抗体的量。待测抗体的量与有色产物成正比。同理也可包被抗体，测定抗原含量。ELISA常用的有直接法测定抗原、竞争法测定抗原、双抗体夹心法测定抗原等方法。