超薄切片_供电子显微镜观察用的切片

超薄切片

供电子显微镜观察用的切片

超薄切片(Ultrathin sectioning) 系供电子显微镜观察用的切片。由于电子穿透组织的能力低，所以供电子显微镜观察用的切片要求极薄（一般厚度为40～50 nm），即为超薄切片。

前言

为了观察生物体的微细结构，电子显微镜所用的超薄切片，需要经过了解取材的基本要求，取材和制备超薄切片的过程，即为透射电镜标本（超薄切片）的制备。

取材的基本要求

组织从生物活体取下以后，如果不立即进行适当处理，会由于细胞内部各种酶的作用，出现细胞自溶现象。此外，还可能由于污染，微生物在组织内繁殖使细胞的微细结构遭受破坏。因此，为了使细胞结构尽可能保持生前状态，必须做到快、小、准、冷：

(1)．动作迅速，组织从活体取下后应在最短时间内 (争取在1分钟内) 投入2.5%戊二醛固定液。

(2)．所取组织的体积要小，一般不超过1mm×1mm×1mm。也可将组织修成1mm×1mm×2mm大小长条形。因

为固定剂的渗透能力较弱，组织块如果太大，块的内部将不能得到良好的固定。

(3)．机械损伤要小，解剖器械应锋利，操作宜轻，避免牵拉、挫伤与挤压。

(4)．操作最好在低温(0℃～4℃)下进行，以降低酶的活性，防止细胞自溶。

(5)．取材部位要准确。

取材

将取出的组织放在洁净的蜡版上，滴一滴预冷的固定液，用两片新的、锋利的刀片成“拉锯式”将组织切下并修小，然后用牙签或镊子将组织块移至盛有冷的固定液的小瓶中。如果组织带有较多的血液和组织液，应先用固定液洗几遍，然后再切成小块固定。

超薄切片的制备

制备超薄切片的设备为超薄切片机，使用的刀为玻璃刀或钻石刀。为了能切成薄片，包埋标本的包埋剂一定要达到一定的硬度，通常是用树脂聚合包埋。

方法与步骤：锇酸和戊二醛固定样品→丙酮逐级脱水→环氧树脂包埋_→以热膨胀或机械伸缩的方式切片_→重金属（铀，铅）盐染色．

参考资料

最新修订时间：2022-06-13 10:51

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前言

取材的基本要求

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