蛋白变性剂，就是指会使得蛋白质发生变性作用的试剂，变性作用是蛋白质受物理或化学因素的影响，改变其分子内部结构和性质的作用。一般认为蛋白质的二级结构和三级结构有了改变或遭到破坏，都是变性的结果。

蛋白质变性的方法有哪些？

能使蛋白质变性的化学方法有加强酸、强碱、重金属盐、尿素、丙酮等；能使蛋白质变性的物理方法有加热(高温)、紫外线及X射线照射、超声波、剧烈振荡或搅拌等。生物方面可以用病毒或某些毒液。

蛋白质变性的结果是怎样的？

（1）生物活性丧失

蛋白质的生物活性是指蛋白质所具有的酶、激素、毒素、抗原与抗体、血红蛋白的载氧能力等生物学功能。生物活性丧失是蛋白质变性的主要特征。有时蛋白质的空间结构只要轻微变化即可引起生物活性的丧失。

（2）某些理化性质的改变

蛋白质变性后理化性质发生改变，如溶解度降低而产生沉淀，因为有些原来在分子内部的疏水基团由于结构松散而暴露出来,分子的不对称性增加，因此粘度增加，扩散系数降低。

盐酸胍和尿素

尿素和盐酸胍在高浓度(4~8mol/L)水溶液时能断裂氢键，从而使蛋白质发生不同程度的变性。同时，还可以通过增大疏水基酸性残基在水相中的溶解度，降低疏水相互作用。在室温下4~6mol/L尿素和3~4mol/L盐酸胍，可使球状蛋白质从天然状态转变至变性状态的中点，通常增加变性剂浓度可提高变性程度，通常8mol/L尿素的变性能力强。一些球状蛋白质，甚至在8mol/L尿素溶液中也不能完全变性，然而在8mol/L盐酸胍溶液中，他们一般以无规则卷曲（完全变性）构象状态存在。

尿素和盐酸胍引起的变性包括两种机制：

（1）变性蛋白质能与尿素和盐酸胍优先结合，形成变性蛋白质-变性剂复合物，当复合物被除去，从而引起N→D反应平衡向右移动。随着变性剂浓度的增加，天然状态的蛋白质不断转变为复合物，最终导致蛋白质完全变性。然而，由于变性剂与变性蛋白的结合是非常弱的。因此，只有高浓度的变性剂才能引起蛋白质完全变性；

（2） 尿素与盐酸胍对疏水氨基酸残基的增溶作用。因为尿素和盐酸胍都具有形成氢键的能力，当他们在高浓度时，可以破坏水的氢键结构，结果尿素和盐酸胍就成为非极性残基的较好溶剂，使之蛋白质分子内部的疏水残基伸展和溶解性增加。尿素和盐酸胍引起的变性通常是可逆的。但是，在某些情况下，由于一部分尿素可以转变为氰酸盐和氨，而蛋白质的氨基能够与氰酸盐反应，引起蛋白质电荷分布的改变。因此，尿素引起的蛋白质变性有时很难完全复性。一些还原剂(半胱氨酸、抗坏血酸、β-巯基乙醇和DTT)的使用，可以还原二硫键，能有助于变性后蛋白的复性。