脑脊液检验是指通过物理学、化学、细胞学等方法对脑脊液进行检验。脑脊液含有一定的细胞及化学成分,病理情况下,被血-脑屏障隔离的物质可进入脑脊液,导致其成分发生变化,脑脊液检验可了解这些变化,帮助进行疾病诊断。
检查前准备
脑脊液标本的获取需要进行腰椎穿刺,必要时可从小脑延髓池或侧脑室进行穿刺采集,因此应向患者或其授权委托人进行检验必要性的说明,同时向其详细阐明穿刺的部位、方法、可能的并发症等,取得其理解和同意后方可进行。脑脊液标本应尽快送检,不能及时送检的应妥善保存。
检查内容
1.一般检查
观察脑脊液透明度、颜色、凝固性,测定其比重及pH。比重测定可用折射仪法进行测定,微量pH值计测量pH。
2.分子成分检查
(1)蛋白质:可用Pandy试验进行蛋白质定性检测,磺基水杨酸-硫酸钠比浊法、双缩脲法、染料结合法进行蛋白质定量检测。
(2)葡萄糖:可用葡萄糖氧化酶法或己糖激酶法进行检测,结果因穿刺部位不同而不同。
(3)氯化物:可用硝酸汞滴定法、硫氰酸汞比色法、离子选择电极法、电量分析法等进行检测。
(4)酶及其他成分:常用酶速率法进行酶的检测,常见的检测指标有天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、乳酸脱氢酶(LD)、肌酸激酶(CK)、腺苷脱氨酶(ADA)等。其他成分包括谷氨酰胺、乳酸及溶菌酶的测定,其中谷氨酰胺可用硫酸加热水解法进行定量检测。
(5)蛋白质电泳:常用乙酸纤维薄膜电泳法、琼脂糖凝胶电泳法进行检测。由于其蛋白质量较少,检查前需经过高分子聚乙二醇或右旋糖酐透析液浓缩方可检测。
(6)免疫球蛋白:检测方法主要有免疫电泳法、免疫散射比浊法和免疫扩散法。利用抗原和抗体在凝胶或特殊缓冲液中进行特异性结合,形成抗原抗体复合物,再通过测定凝胶中抗原抗体复合物沉淀环直径或特殊缓冲液中抗原抗体复合物浊度,计算出免疫球蛋白含量。
(7)髓鞘碱性蛋白测定:可用酶联免疫吸附试验(ELISA)法或放射免疫法进行检测。
3.细胞学检查
(1)细胞总数计数:可用体液细胞分析仪进行分析,或使用显微镜计数法进行分析。显微镜计数法是将脑脊液标本充入血细胞计数板内,低倍镜下计数2个计数室四角和中央大方格共10个方格内的细胞数,细胞过多、浑浊或血性脑脊液可稀释后计数,再换算为细胞总数。
(2)白细胞计数:可用体液细胞分析仪进行分析,或用显微镜计数法进行分析。非血性标本用冰乙酸浸洗过的吸管吸取脑脊液标本,充入血细胞计数板内计数。白细胞过多时可先进行稀释再计数,最后进行换算。
(3)白细胞分类计数:可用体液细胞分析仪进行分类计数,也可使用显微镜分类法或染色分类法进行分类计数。显微镜分类法是在高倍镜下对100个有核细胞进行分类计数,如数量不足则直接记录具体数字。染色分类法则是将标本进行离心,取沉淀物进行涂片,干燥后行Wright染色,再进行分类计数。
4.病原学检查
(1)细菌:可用显微镜检查、细菌培养和ELISA法进行检测。显微镜检查可用直接涂片法或涂片染色法进行检查。细菌培养应选择适当的培养基和培养环境,并可在培养后进行药敏试验。
(2)寄生虫:显微镜检查可发现血吸虫卵、肺吸虫卵、弓形虫、阿米巴滋养体等,脑囊虫病患者可进行脑囊虫补体结合试验,神经梅毒诊断首选螺旋体荧光抗体吸收试验。
正常参考值
1.一般检查
正常的脑脊液为清澈透明的无色或淡黄色水样液体,放置24小时不形成薄膜,无凝块或沉淀,腰椎穿刺脑脊液比重1.006~1.008,脑室穿刺脑脊液比重1.002~1.004,小脑延髓池穿刺比重1.004~1.008。
2.化学成分检查
(1)蛋白质:定性检查为阴性或弱阳性,定量检查腰椎穿刺脑脊液为0.2~0.4g/L、小脑延髓池穿刺脑脊液为0.1~0.25g/L、脑室穿刺脑脊液为0.05~0.15g/L。
(2)葡萄糖:腰椎穿刺脑脊液为2.5~4.4mmol/L,小脑延髓池穿刺为2.8~4.2mmol/L,脑室穿刺为3.0~4.4mmol/L。
(3)氯化物:成人:120~132mmol/L; 儿童:111~123mmol/L; 婴儿:110~122mmol/L。
(4)酶及其他成分:AST:<20U/L,ALT:<15U/L,LD:<40U/L,CK:0.5~2U/L,ADA:0~8U/L,谷氨酰胺用硫酸加热水解法测定值为0.41~1.10mmol/L,乳酸:1.0~2.9mmol/L,溶菌酶无或含量甚微。转氨酶(ALT、AST):约为血清酶活性的1/2;乳酸脱氢酶(LDH);约为血清酶活性的1/10;磷酸肌酸激酶(CPK):低于血清酶活性。
(5)蛋白质电泳:前白蛋白:0.03~0.07,白蛋白:0.51~0.63,α1球蛋白:0.06~0.08,α2球蛋白:0.06~0.10,β球蛋白0.14~0.19,γ球蛋白0.06~0.10。
(6)免疫球蛋白:IgG:10~40mg/L,IgA:0~6mg/L,IgM:0~013mg/L,IgE含量极低。
(7)髓鞘碱性蛋白测定:含量<4μg/L。
3.细胞学检查
正常人脑脊液无红细胞,白细胞因年龄不同而异,成人:(0~8)×106/L,婴幼儿(0~15)×106/L,新生儿(0~30)×106/L。细胞分类多为淋巴细胞及大单核细胞,二者比例约为7:3,有时可见内皮细胞,无中性粒细胞。
4.病原学检查
正常人脑脊液无细菌、寄生虫或寄生虫卵检出。
临床意义
脑脊液检查结果对疾病诊断尤其是中枢神经系统疾病的诊断有重要意义。其对细菌性脑膜炎、结核性脑膜炎和真菌性脑膜炎检查有高灵敏度和高度特异性,对病毒性脑膜炎、蛛网膜下腔出血、多发性硬化症、神经梅毒、椎旁脓肿等检查有灵敏度和中等特异性,对脑膜恶性肿瘤检查有中等灵敏度和高特异性,对颅内出血、病毒性脑炎、硬膜下血肿有中等灵敏度和中等特异性的提示作用。脑脊液中检出病原体对具有直接诊断的意义,对脑脊液成分的检测可为治疗效果评估、预后判断提供参考。