糖基化工程
通过对蛋白质表面的糖链进行改造、从而改良蛋白质性质的技术
糖基化工程是在深入研究糖蛋白中糖链结构与功能关系的基础上,通过人为的操作(包括增加、删除或调整)蛋白质上的寡聚链,使之产生合适的糖形,从而达到有目的地改变糖蛋白的生物学功能。
工程原理
蛋白质的糖基化就是在多肽主链上共价附加糖基,它与磷酸化、甲基化、酰基化等过程同属真核细胞蛋白质翻译后加工过程。
所谓蛋白质糖基化工程,就是通过对蛋白质表面的糖链进行改造,从而改良蛋白质性质的一种技术。常用的对糖链进行改造的方法有:
(1)通过定点突变技术增加或减少蛋白质的糖基化位点,从而增加或减少蛋白质表面的糖链。
(2)在体外通过化学或酶法对糖链进行修饰。
(3)细胞内由一系列糖苷酶和糖基转移酶组装成糖基化途径(glycosylation pathway)来催化蛋白质的糖基化。通过基因工程手段改变宿主细胞内糖基化途径中糖苷酶和糖基转移酶的表达,即可改变在该系统中表达的糖蛋白的糖基化形式。已通过该方式对酿酒酵母、巴斯德毕赤酵母、昆虫细胞、CHO细胞及转基因植物等多个表达系统进行了糖基化工程的改造。
(4)研究表明,糖基化还受到细胞培养条件的影响。可通过改变细胞培养过程中培养基的糖分、激素及氨离子浓度等条件来改变蛋白质的糖基化。
研究方法
糖基化工程的目的之一是生产具有应用价值或者说合乎人们需要的糖蛋白,而生产这种合乎人们需要的糖蛋白关键在于获得合适的糖形。一般来说具有以下5种基本方法:
参考资料
最新修订时间:2022-08-12 17:29
目录
概述
工程原理
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