磷酸
缓冲液(PB,Phosphate
Buffer),是
生物化学研究中使用最为广泛的一种缓冲液,通常使用的有
磷酸钠缓冲液(NaH2PO4&Na2HPO4)和
磷酸钾缓冲液(K2HPO4&KH2PO4),由于它们有二级解离,缓冲的pH值范围很广。
NaH2PO4·2H2O:Mr=156.03,0.2
mol/L溶液为31.21g/L,
NaH2PO4·
H2O:Mr=138.01,0.2mol/L溶液为27.6g/L。
根据要求的PH值,取X毫升甲液与Y毫升乙液,混合均匀即得.
磷酸缓冲液的缓冲pH值范围非常广泛,可配置各种pH值的酸性、碱性和中性缓冲液,配制酸性缓冲液可直接用NaH2PO4或KH2PO4,pH范围在1-5;碱性缓冲液可直接用Na2HPO4或K2HPO4,pH范围在9-12;中性缓冲液则用等浓度的NaH2PO4和Na2HPO4或者等浓度的KH2PO4和K2HPO4溶液混合,pH在5.5-8.5。
通常所说的磷酸缓冲液的浓度是指溶液中含有的所有的
磷酸根离子的浓度,而不是
钠离子(Na+)或者
钾离子(K+)的浓度。正是因为如此,在配制中性缓冲液时,用等浓度的NaH2PO4和Na2HPO4或者等浓度的KH2PO4和K2HPO4溶液混合,并不影响磷酸根离子的浓度,所得的缓冲液浓度仍是等浓度的NaH2PO4和Na2HPO4或者等浓度的KH2PO4和K2HPO4溶液原来的浓度,但是缓冲液中的钠离子(Na+)或者钾离子(K+)的浓度已经发生变化。
磷酸缓冲液的优点:(1)易配制各种浓度的缓冲液;(2)适用的pH值范围宽,可配置各种pH值的缓冲液;(3)pH受温度影响较小;(4)
缓冲能力强,缓冲液被稀释后pH变化小。
磷酸缓冲液的缺点:(1)易与常见的钙离子Ca2+、Mg2+及一些重金属离子
缔合形成沉淀;(2)会抑制某些生化
反应过程,如抑制某些酶的催化过程等。