R.柯赫(Koch,1881)最早创造了如下方法:把附有细菌的丝线浸入消毒剂洗涤后,再移入培养基中以确认其死灭情况(德语称该法为Fade-nmethode)。1903年莱迪尔(S.Rideal)和沃克(J.T.A.Walker)又试行了下列方法:在把消毒剂分级稀释,然后加入一定量的细菌,每隔两分半钟取出,在培养基中进行接种检查,并求出五分钟时生长、十分钟时死灭的稀释倍数,再和用石碳酸进行同样操作所得的值之比,作为石碳酸系数,对消毒效应加以计量化。例如
金黄色葡萄球菌的值即为:升汞175;红汞20:碘286等。此外,美国把莱迪什(Re-dish,1927)提倡的方法进行了规范化,称为FDA(Food and Drag Adminstration)石碳酸系数。