甲酸脱氢酶,在甘油
厌氧发酵生产1,3-丙二醇的过程中,需要消耗
还原当量NADH,NADH的有效供给决定了1,3-丙二醇的产量和得率。采用PCR方法从Candidaboidinii
基因组中克隆编码甲酸脱氢酶
基因fdh,将fdh基因片段插入载体pMAL^TM-p2X中,构建
表达载体pMAL^TM-p2X-fdh,并转入1,3-丙二醇生产菌KlebsiellapneumoniaeYMU2,获得重组菌KlebsiellapneumoniaeF-1。
研究了
重组质粒的稳定性和
IPTG诱导fdh基因过量表达的条件。结果表明,重组质粒具有良好的稳定性;fdh
基因表达的蛋白分子量为40.2kDa;IPTG诱导表达研究表明,在IPTG浓度为0.5mmol/L时,诱导4h后甲酸脱氢酶表达明显;发酵过程中甲酸脱氢酶比酶活达到5.47U/mg;与
出发菌株K.pneumoniaeYMU2相比,重组菌F-1合成1,3-丙二醇的
浓度提高了12.5%