一种用于细胞染色的
染料,又称瑞氏染料,是
碱性染料美蓝(Methylene blue)和
酸性染料黄色
伊红(Eosin Y)的合称。伊红美蓝染料染色称为瑞氏(Wright's stain;美蓝-伊红Y)染色。
一种用于细胞染色的染料,又称瑞氏染料,是
碱性染料美蓝(Methvlem blue)和
酸性染料黄色
伊红(Eostm Y)的合称。伊红美蓝染料染色称为瑞氏(Wright's staim;美蓝-伊红Y)染色。
在配制的
瑞氏染液中美蓝如放置过久即可氧化而含有天青,美蓝天青与伊红化合物能使核染成紫红色,但不能使胞浆染为蓝色,多余美蓝就可以使
胞浆染成蓝色,染色主要是化学作用,是离子彼此结合的反应。
2.
甲醇具有强大的脱水力,可将细胞固定在一定形态及增加
细胞结构的
表面积,提高细胞对染料
吸收作用,同时由于甲醇吸附染色液中的水,使染色液升温,加速
染色反应。
○先称干燥(事先放入温箱干燥过夜)瑞氏染料放置
乳钵内,用乳棒轻轻敲碎染料成粉末,再行研磨至听不到研芝麻声即呈细粉末,加少许
甘油或
甲醇溶解研磨,使染料在乳缸内显“一面镜”光泽,而无染料粉粒沉着。
○再加较多量甲醇研磨呈一面镜光亮,
静置片刻,将上层液体倒入一清洁储存瓶内(最好用甲醇空瓶),再加甲醇研磨,重复数次,至乳钵内染料及甲醇用完为止,摇匀,密封瓶口。
伊红美蓝培养基(eosin-methylene blue medium,简称
EMB medium),一般用于检测
大肠杆菌。
在
碱性环境中不分解乳糖产酸的细菌不着色,伊红和美蓝不能结合,故
沙门氏菌等为无色或
琥珀色半透明菌落。金葡菌在此
培养基上不生长。
常用的伊红美蓝乳糖培养基,可用来鉴别饮用水和乳制品中是否存在
大肠杆菌等细菌。如果有大肠杆菌,因其强烈分解乳糖而产生大量的
混合酸,菌体带H+,故菌落被染成
深紫色,从菌落表面的反射光中还可以看到
金属光泽。
先将琼脂加至900ml蒸馏水,加热溶解,然后加入磷酸氢二钾及蛋白胨,
混匀使之溶解,再以蒸馏水补足至1000ml,调整
PH为7.2~7.4。趁热用
脱脂棉或
绒布过滤,再加入乳糖,混匀后定量分装于
烧瓶内,置
高压蒸汽灭菌器内以115℃灭菌20min,贮存于冷暗处备用。