鲁普莱希特-卡尔斯-海德堡大学（德文：Ruprecht-Karls-Universität Heidelberg；拉丁文：Ruperto Carola Heidelbergensis），简称海德堡大学，始建于1386年，坐落于巴登-符腾堡州大学城海德堡，是德国境内最古老的大学，也是神圣罗马帝国继查理大学（1348）和维也纳大学（1365）之后的第三所大学，是4EU+联盟、德国精英大学、欧洲研究型大学联盟、科英布拉集团、U15大学联盟及欧洲大学协会成员。

1385年末，海德堡大学初由大公鲁普莱希特一世（Ruprecht I）依教皇伍朋六世特许筹建，以为分裂的普法尔茨营造一思想中心，第一任校长是英格恩的马西利乌斯（Marsilius of Inghen），他是海德堡大学的创始人之一，他担任了不下9次校长。在1386-1392年和1396年期间吸纳外邦人才，服务于教会及国家。而早期的教授均来自宗教分裂与民族战争频仍地区，寻求平和于海德堡。14世纪彼得教堂成为大学教堂。历任大公均对大学倾注心力，然当其虑及必要时，亦得随意插手大学自主自治之事务。由此也为诸如人文主义等思潮的到来创造了历史条件。

尽管马丁·路德于1518年倡导宗教改革，海德堡大学长时间均未受此影响。直到1556年时才由奥腾里希（Ottheinrich）大公将其转变为一个新教大学。16世纪后半叶由弗里德里希三世（Friedrich III）将海德堡大学建成了具有加尔文主义精神的欧洲科学与文化中心。其加尔文主义理念的光芒吸引了全欧众多教授与学者纷涌而至。在神学院的影响下，1563年出现了著名的海德堡教理问答录。除加尔文主义外，16世纪末出现了后人文主义。