正磷酸盐常被称为活性磷酸盐，因为只有这种磷酸盐会和比色法测定磷酸盐的试验中所用的试剂直接发生反应。这种类型的磷酸盐被植物、细菌和藻类所利用，被认为是湖泊等地表水体中的一种限制性营养盐。其他的磷酸盐就叫非活性磷酸盐。

磷在水中几乎只以磷酸盐的形式存在。磷酸盐可以溶解，吸附在颗粒物上，或是存在于水生生物体内。磷酸盐可能以最简单的正磷酸盐（PO43-）形态存在，也可能以分子量更大的形态存在，例如缩合磷酸盐和有机磷酸盐。

正磷酸盐常被称为活性磷酸盐，因为只有这种磷酸盐会和比色法测定磷酸盐的试验中所用的试剂直接发生反应。这种类型的磷酸盐被植物、细菌和藻类所利用，被认为是湖泊等地表水体中的一种限制性营养盐。化肥含有正磷酸盐，并可能随着农业用地的径流进入水体，使水体中含有大量磷元素。

水样中的活性磷酸盐采用磷钼蓝法测定。活性磷酸盐在一定的酸性条件下可与钼酸铵作用，生成淡黄色的磷钼酸铵，但磷钼酸铵发色能力弱，在通常的磷浓度下显不出黄色来。磷钼酸铵可被还原剂抗坏血酸还原成发色能力很强的蓝色化合物——“钼蓝”，还原后的溶液在690nm处有较大吸收，可用比色法分析。

1．分光光度计及配套比色皿

2．具塞比色管

3．容量瓶、移液管等常规实验室设备

1．硫酸溶液（1:2）：在不断搅拌下将浓硫酸缓缓倒入同体积蒸馏水中，冷却后盛于试剂瓶中。

2．酒石酸锑钾：溶解6g酒石酸锑钾于200ml水中，贮于聚乙烯瓶中，溶液变混浊时，应重配。

3．钼酸铵溶液（10%）：称取5g钼酸铵固体[(NH4)6Mo7O24·4H2O]，溶解后稀释至50ml，若溶液浑浊应取其澄清液贮于聚乙烯瓶中。

4．钼酸铵—硫酸混合试剂：45ml钼酸铵溶液与200ml硫酸溶液混合，加入5ml酒石酸锑钾溶液，混匀后贮于聚乙烯瓶中，此溶液避光保存可稳定数日，如发现混浊须重新配制。

5．抗坏血酸溶液：溶解20g抗坏血酸（C6H8O6）于200mL水中，盛于棕色试剂瓶中。此溶液4℃避光保存，可稳定1个月。

6．磷标准贮备液（0.2mg PO43--P/mL）：称取KH2PO4（AR，于115℃下烘1h）0.8790g溶于蒸馏水中，并转入1000ml容量瓶中定容。

7．磷标准使用液（2ug PO43--P/mL）：移取1.0ml标准贮备液于100ml容量瓶中定容。

1．绘制工作曲线

①取6个25ml具塞比色管，分别加入0、0.50、1.00、1.50、2.00、2..50ml磷标准使用液，加水至标线，混匀。

②分别加入钼酸铵—硫酸混合试剂1ml，混匀后放置3min；再分别加入抗坏血酸溶液1ml，混匀后显色10min。

③用分光光度计在690nm波长处，于比色皿中对照蒸馏水测定上述溶液的吸光度E值（其中试剂空白吸光度为E0）。

④在坐标纸上，以吸光度E-E0为纵坐标，磷浓度为横坐标作图，得工作曲线。

2．水样的测定（双样测定，取平均值）

① 取25ml水样于比色管中。

② 参照标准曲线绘制过程中的步骤②、③，显色并测定该水样的吸光度值Ew。

由水样的测定值Ew-E0查工作曲线，得该水样中活性磷酸盐的含量。

1．显色后须在30min之内测定溶液的吸光度值，30min之后溶液的颜色将逐渐减退。

2．水样的含盐量对磷钼蓝的显色有影响。对于海水样品，上述从工作曲线上查得的数值尚需乘以适当的校正系数Ks，才能获得海水样品中活性磷酸盐磷的实际浓度。

3．由于磷钼蓝的摩尔吸光系数较小，比色时采用液层厚度较大的比色皿可提高测定的精确度。