DNA或RNA先转移并固定到
硝酸纤维素或尼龙膜上,与其互补的单链DNA或
RNA探针用放射性或非放射性标记。在膜上杂交时,探针通过氢键与其互补的靶序列结合,洗去未结合的游离探针后,经
放射自显影或显色反应检测特异结合的探针。
2:经
琼脂糖凝胶电泳将片段的DNA或RNA转移到膜上(Southern和Northern印迹法)。DNA在电泳前先用
限制性内切酶消化。
将少量核酸样品点样在硝酸纤维素滤膜上,80℃烘烤后可牢固地固定在膜上,再用探针进行杂交。尼龙膜,特别是
聚偏氟乙烯(PVDF)与DNA结合力更高,坚韧、易操作。点样可手工,也可用手工点样品。检测可用放射性探针自显影或非放射性探针显色。
在保持细胞形态条件下,进行细胞内杂交,显影或显色。可用于DNA或RNA分析。荧光原位杂交(FISH)进行
染色体DNA分析可用于生物学研究的许多领域以及临床细胞遗传学研究。其主要优点是不仅可以在细胞分裂的中期,而且可在分裂间期核中诊断染色体的变化。