核孔复合体是镶嵌在内外
核膜上的篮状复合体结构,主要由
胞质环、
核质环、
核篮等结构组成。核孔复合体可以看作是一种特殊的
跨膜运输蛋白复合体,是一个双功能、双向性的
亲水性核质交换通道,控制物质进出
细胞核。
定义
核孔复合体是镶嵌在内外核膜上的篮状复合体结构,主要由胞质环、核质环、
核篮等结构组成,是物质进出细胞核的通道。一般的,一个脊椎
动物细胞核上有大约1000个核孔复合体。当然,这一数量随细胞种类以及细胞所处的
细胞周期中阶段不同而改变。
结构上,核孔复合体主要由
核孔蛋白构成。大约一半的核孔蛋白含有螺旋
蛋白结构域,而另一半的核孔蛋白具有典型的“天然未折叠”结构特征(高度灵活并缺乏有序的
三级结构)。
功能上,核孔复合体可以看做是一种特殊的跨膜运输蛋白复合体,并且是一个双功能、双向性的
亲水性核质交换通道。
不同生物的
核膜孔具有相同结构,并以核孔复合体的形式存在。它的内外口径约为70~80纳米,通道的直径约为9纳米。核膜孔内外口的周边均有对称排列的8个球状颗粒,其直径约15纳米;中央尚有一个中心颗粒,直径约30纳米。中心颗粒与球状颗粒之间有细丝相连。这些细丝具有
核糖核蛋白的性质。核膜孔通道中还有一些无定形物质。核膜孔的数目、分布和密度与
细胞代谢活性有关,核质与细胞质之间
物质交换旺盛的部位核膜孔数目多。可见,核膜孔在调节核与细胞质的物质交换中有一定的作用。
结构
核孔复合体是指镶嵌在核孔上的一种复杂的结构。主要有以下四种结构组分:
1.
胞质环:位于核孔边缘的
胞质面一侧,又称外环。环上有8条
短纤维对称分布并伸向胞质。
2.核质环:位于核孔边缘的核质面一侧,又称内环。环上有8条细长纤维对称分布,向核内伸入50~70nm,在纤维末端形成一个直径为60nm的小环。
3.辐:由核孔边缘伸向中心,呈辐射状八重对称。可进一步分为3个区域:①
柱状亚单位,位于核孔边缘,连接内、外环,起支撑作用。②腔内
亚单位,在柱状亚单位之外,接触
核膜部分的区域,它穿过核膜伸入双层核膜的核周围间隙。③
环带亚单位,在柱状亚单位之内,靠近核孔复合体中心的部分,由8个
颗粒状结构环绕形成核孔复合体核质交换的通道。
4.栓:又称中央栓。位于核孔中心,呈颗粒状或棒状,所以又称为
中央颗粒。
核孔复合体对于垂直于核膜孔中心的轴呈辐射状八重对称结构,而相对于平行核膜面则是不对称的。
功能
核孔复合体是核质交换的双向选择性亲水通道,是一种特殊的
跨膜运输的
蛋白质复合体。他具有双功能和双α-
向性。双功能表现在两种
运输方式:
被动扩散与
主动运输。双向性表现在既介导
蛋白质的入核运输,又介导
RNA RNP等的出核运输。
1949-1950年间,H.G.Callan与S.G.Tomlin在用
透射电子显微镜观察
两栖类卵母细胞的
核被膜时发现了核孔,随后人们逐渐认识到核孔并不是一个简单的孔洞,而是一个相对独立的复杂结构。
1959年M.L.Waston将这种结构命名为核孔复合体(nuclear pore complex,NPC)。
核孔复合体在核的有选择性的
物质转运中起重要作用 。蛋白质分子都是在
细胞质中合成的(细胞质中的
核糖体是
蛋白质合成的机器)。
大分子的蛋白质通过核孔进入细胞质中。核孔对大分子的进入是有选择性的,如
mRNA分子的前体在核内产生后,只有经过加工成为
mRNA并与蛋白形成复合物后才能通过。大分子凭借自身的
核定位信号和核孔复合体上的受体
蛋白结合而实现的“
主动转运”过程。
一般的,
小分子物质(<30-60kDa)可以通过被动扩散的方式通过核孔复合体。一般来讲,有效的通过核孔的转运过程需要多种因子的参与。特别的,核转运受体与货物分子结合,介导其入核或出核的
运输过程。核转运受体中最大的家族是
核转运蛋白,包含多种
输入蛋白以及
输出蛋白。核转运蛋白又被划分为 -核转运蛋白以及 -核转运蛋白。其他的核转运受体包括NTF2以及NTF2类似蛋白。
蛋白质的入核运输
具有暴露的
核定位序列(NLS)的货物分子能够迅速高效地通过核孔转运入核。已知的几种核定位序列大多包含保守的
氨基酸序列,如PKKKRKV。具有核定位序列的分子会被输入蛋白识别并运入核内。
经典的入核机制如下所述。具有
核定位序列的蛋白首先与α-输入蛋白结合,之后α-输入蛋白与β-输入蛋白结合。形成的复合体被定位至核孔并通过
扩散作用通过核孔。入核后,Ran
GTP与β-输入蛋白结合,使其脱离复合体。之后,
细胞凋亡易感性蛋白(CAS)——一种与RanGTP结合输出蛋白,使α-输入蛋白与货物分子脱离。随后RanGTP-β-输入蛋白复合体和RanGTP-CAS-α-输入蛋白复合体通过扩散作用出核。在核外GTP水解为
GDP,导致两种输入蛋白被释放,继续介导下一次具有NLS蛋白的入
核过程。
虽然货物蛋白跨核膜的转运需要
辅助蛋白,但转运过程本身不消耗能量。但是,整个循环的完成需要将两分子GTP水解为GDP,因此整个转运过程应被看作一种主动运输。运输的能量主要由
细胞核内与细胞质之间的RanGTP梯度提供。这种梯度的产生主要由于一种核内的蛋白——RanGEF,将Ran上的GDP交换为GTP,因此导致核内RanGTP浓度高于核外。
蛋白质的出核运输
一些分子或
生物大分子复合物需要从核内被转运出核进入细胞质,如
核糖体亚基,因此存在与入核过程相似的机制来实现这一过程。
具有核输出序列(NES)的蛋白可以在核内与输出蛋白(如CRM1)以及RanGTP结合形成复合体,随后通过
扩散过程出核。之后GTP被水解,蛋白被释放到细胞质中,而CRM1-RanGDP扩散回到核内,GTP通过RanGEF被交换为GDP。由于过程中伴随一个GTP分子的水解,整个过程仍然是消耗能量的。
RNA的出核运输
不同种类的RNA具有不同的出核通路。一般的,RNA出核通过
RNA结合蛋白上的NES序列介导(除
tRNA)。同时,所有的病毒RNA以及细胞RNA(tRNA,
rRNA,U
snRNA,microRNA),除去mRNA都是依靠RanGTP出核的。mRNA具有特定的出核因子,一般是Mex67/Tap以及Mtr2/p15。在高等
真核细胞内,mRNA的出核被认为依赖于剪接,而剪接又反过来招募蛋白复合体,TREX,来剪切mRNA。然而,对于特定的mRNA(如用于
组蛋白),生物体内存在不依赖于剪接的mRNA输出替代路径。