利用来源相同的蛋白质和碱性〔或酸性)氨基酸含量大体相同这一特点，加入过量的酸性(或碱性)染料，使其和蛋白质形成不溶性盐而沉淀析出，以
分光光度计测定反应前后溶液的透明度，然后根据计算出来的结合染料量求得蛋白质含量。通常用精制的酸性橙12配成试剂染料溶液、在480nm波长下测定透光度。该法操作较简单，如样品来源相同，可同时进行多个样品的测定，灵敏度也较高，但染料与蛋白质的反应较复杂，操作方法和实验条件必须标准化，蛋日质总碱性基团与染料之间才符合化学计量的关系。由于不同染料与样品中蛋白质的结合力不同，有时还有非特异性的吸着，所以必须注意选择合适的染料。这个方法不能用于不同来源蛋白质的比较定量。