最低杀菌浓度（：杀死99.9%（降低3个数量级）的供试微生物所需的最低药物浓度。有些药物的MBC与其最低抑菌浓度(MIC)非常接近，如氨基糖
苷类。有些药物的MBC比MIC大，如β内酰胺类。如果受试药物对供试微生物的MBC≧32倍的MIC，可判定该微生物对受试药物产生了耐药性。
将药品有效抑菌浓度药液和对照组对应的浓度药液0．1ml移种至不含药物的营养培琼脂平皿上，用灭菌接种环轻推药液，将平皿至于37℃培养箱中培养24h，观察有无细菌生长，以平皿培养皿中计数少5个菌落作为最低杀菌浓度。
最低杀菌浓度测定结果受多种因素影响，因此，对于试验所用的接种菌液 浓度、培养基的化学组成和性质( 固体或液体) 、pH 值、渗透压、 离子强度、阳离子和生长因子的浓度、环境条件( 如温度、各种 气体的分压力、湿度等) 以及质量控制等应有相应认识，确定实验方法是否符合标准要求，是否也可用于临床分离菌的药敏试验。
最低杀菌浓度是反映抗菌活性的重要指标，了解其实验方法和质量控制情况，确定实验方法是否符合标准要求，分析实验结果及其对临床试验的价值，如杀灭90%细菌的最低杀菌浓度，比较杀菌浓度与抑菌浓度间关系。