明胶培养基是在水浴锅中将NaCl-5g，
蛋白胨-10g，牛肉膏-3g，
明胶-120g，蒸馏水-1000mL这些成分溶化，不断搅拌。溶化后调pH 7.2~7.4，115°C 灭菌15min（温度过高明胶分子结构被破坏，不再凝固）。
明胶液化( gelaune liquefaction)指细菌把明胶分解成液状的现象。这是因为有些细菌具有明胶酶(亦称类蛋白水解酶)，能将明胶先水解为多肽，又进一步水解为氨基酸，使其失去凝胶性质，从而使半固体的明胶培养基成为流动体，即液化。这种能力因细菌种类不同而有显著差异，因此很早以来就被作为鉴别、测定细菌的一种特征。例如:
葡萄球菌属、变形菌属、
芽孢杆菌属物具有液化能力，而
大肠杆菌就无这种液该培养基中蛋白胨和牛肉膏粉为微生物生长提供氮源、维生素、矿物质；某些含明胶酶的细菌
水解明胶，使其液化而降低明胶的胶凝作用。
a称取适量明胶培养基(营养明胶)，加入蒸馏水或
去离子水，搅拌加热意沸至完全溶解，分装试管高层，116℃高压灭菌15min，垂直放置待培养基凝固后，备用；
b挑取18~24h待检验培养物，以较大量穿刺接种于明胶高层约2/3深度就点种于
平板培养基；
d每天观察结果，若因培养温度高而使明胶本身液化时应不加摇动、将接种物放于2-8℃约10-90min待降温后取出观察，若果确实被液化，即为试验阳性；平板试验结果的观察为在培养基平板点种的菌落上滴加试剂，若为阳性，10~20m落周围应出现清晰带环。否则为附性。
临床上主要用于肠杆菌科细菌的鉴别，如少雷菌、
普通变形杆菌、奇昇变形杆菌、阴沟杆菌等可液化明胶，而其他细菌很少液化明胶。有些厌氧菌如产气英膜梭菌、
脆弱类杆菌等也能液化明胶。另外多数
假单胞菌也能液化明胶。