散射光当一束平行单色光照射在液体样品上时,大部分光线透过溶液,小部分由于光子和物质分子相碰撞,使光子的运动方向发生改变而向不同角度散射,这种光称为散射光(scattering light) 。
光子和物质分子发生弹性碰撞时,不发生能量的交换,仅仅是光子运动方向发生改变,这种散射光叫做瑞利光(Rayleigh scattering light),其频率与入射光频率相同。
光子和物质分子发生
非弹性碰撞时,在光子运动方向发生改变的同时,光子与物质分子发生能量的交换,光子把部分能量转移给物质分子或从物质分子获得部分能量,而发射出比入射光频率稍低或稍高的光,这种散射光叫做拉曼光(Raman scattering light)。
散射光对荧光测定有干扰,尤其是频率比入射光频率更低的拉曼光,因其频率与荧光频率接近,对荧光测定的干扰更大,必须采取措施消除。选择适当的激发频率可消除拉曼光的干扰。
(1)以
硫酸奎宁为例,从图a可见,无论选择320或350mn为激发光,荧光峰总是在448nm,将空白溶剂分别在320及350mn激发光照射下进行测定。从图b可见,当激发光波长为320mn时,溶剂的拉曼光波长是360nm,对荧光测定无干扰;当激发光波长为350mn时,拉曼光波长是400nm,对荧光测定有干扰,因而应选择320mn为激发波长。
(2)
三氯甲烷五种常用溶剂在不同频率激发光照射下拉曼光的频率,可供选择激发光频率或溶剂时参考。从表中可见,
四氯化碳的拉曼光与激发光的频率极为相近,所以其拉曼光几乎不干扰荧光测定。而水、乙醇及环己烷的拉曼光频率较低,使用时必须注意。
摄影照明光线有直射光和散射光之分。直射光为硬光、散射光为软光。 散射光为发光面积较大的光源发出的光线。其典型的散射光是
天空光。以及带柔光玻璃的灯具,环境反射光也大多是散射光。如水面、墙面、地面等。散射光的特征是光线软,受光面和背光面过渡柔合,没有明显的投影。因此对被摄对象的形体、轮廓、起伏表现不够鲜明。这种光线柔和,宜减弱对象粗糙不平的质感,使其柔化。用于拍人物老的显得年青些,年轻的显得漂亮些。
光线的选择,对勾画被摄对象的形状、体积、质地、轮廓等外部特征具有重要意义。在自然光照明条件下,有时只有
散射光照明,只有单一的
直射光照明是极少见的,大都是直射光和散射光混合光照明。