放射免疫测定技术
放射性核素标记来检测抗原抗体反应的高灵敏度的技术
放射免疫测定技术(Radiomunoasay,RIA)用放射性核素标记来检测抗原抗体反应的高灵敏度的技术。可用标记抗原或标记抗体检测相应的抗体或抗原。待测抗原和标记抗原对有限量抗体存在竞争性结合,Ag*+ Ab4>Ag*-Ab; Ag + Ab一Ag-Ab; 抗原用核素(如I、H 等) 标记后仍能与相应抗体特异性结合; 将两类抗原与抗体混合后,两类抗原均能与抗体结合,当Ag* 和Ab 的数量恒定,且Ag* 与Ag 之和大于Ab 上结合点数目时,Ag* 与Ag 存在竞争抑制: Ag 数量增加,Ag-Ab生成量增加; Ag*-Ab 数量就减少,游离的Ag* 就增多。用层析等方法将Ag*-Ab 和Ag-Ab复合物(B) 与游离Ag*和Ag (F) 分离,测定B和F的放射活性。
绘制B/F和Ag量的关系曲线图。预先用一系列已知浓度的未标记抗原和一定量的标记抗原及抗体混合,以相同方法绘制B/F 和Ag 量的关系的标准竞争抑制曲线图。根据待测Ag 的放射性结合率,依标准曲线即能查出Ag 量。由于放射线对人体有一定的危害,目前逐渐用下列方法来取代放射标记。
参考资料
最新修订时间:2023-12-27 21:38
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