第二次世界大战爆发后，德、日为进一步在欧、亚扩大侵略战争，于1940年9月在
东京举行谈判，意大利随后也加入谈判。9月27日三国在
柏林签订军事
同盟条约，即《德意日三国同盟条约》，通称《三国轴心协定》，又称《柏林公约》。条约有效期为10年。至翌年6月，
匈牙利、
罗马尼亚、
斯洛伐克、
保加利亚和
克罗地亚等国也相继加入该条约。
条约共6条，主要内容是：日本承认并尊重德意在欧洲建立新秩序的领导权，德意承认并尊重日本在“大东亚”建立新秩序的领导权；三国保证如缔约国一方受到目前未参与欧战或中日“冲突”中的一国攻击时，应以一切政治、经济和军事手段相援助；上述条款毫不影响各缔约国与苏联现存的政治地位。此外，在三国谈判期间，德日还通过互换照会秘密商定：一旦日英发生战争，德国将以所拥有的一切手段援助日本；德国同意将其由日本
委任统治的太平洋地区前殖民地仍由日本管辖，其他地区则在战后先由德国收回，然后再与日本讨论其归属问题，尽可能照顾日本利益，日本为此应向德国提供相应补偿。
第二次世界大战爆发前，德、意、日建立军事同盟的谈判即已开始。但由于
希特勒首先要进攻英、法，而日本则试图把侵华战争扩大到苏联，双方目标不一，谈判未获结果。大战爆发后，日本推行“南进”战略，面临可能与美国发生正面冲突的危险，需要德国的配合。正着手进攻英国的德国，也希望日本能在亚洲发动攻势牵制英美。德日为进一步在欧、亚扩大侵略战争，于1940年9月在东京举行谈判，意大利随后也加入谈判，并在柏林签订该条约。作为条约的补充，1941年12月11日，三国又签署了《德意日联合作战协定》。该条约是《
反共产国际协定》和《德意日三国同盟条约》的进一步发展，它标志着德、意、日
法西斯军事同盟正式形成，加速了
苏德战争和太平洋战争的爆发。而随着意大利、德国、日本等法西斯国家在第二次世界大战中陆续战败投降，这个法西斯同盟也被彻底埋葬了。
德意志、意大利和日本的政府认为世界一切国家各据有应有的空间是任何持久和平的先决条件，决定在致力于大东亚以及欧洲各区域方面互相援助和合作，其首要目的为在各该区域建立并维持事物的新秩序，旨在促进有关人民的共同繁荣与福利。