虽然
放射自显影技术证明了
分泌蛋白合成的起始部位,但不能证明合成分泌蛋白的是何种
细胞器。AlbertClaude和ChristianDeDuve发展了
细胞组份
分离技术,分离到了具有
蛋白质合成和分泌功能的结构。这些结构称为微粒体。
用机械
匀浆将
细胞破碎,各种膜细胞器破碎,并且重新自我融合形成各种球形膜泡,通过较高速度离心除去
细胞核、
线粒体、
过氧化物酶体等细胞器。收集
悬浮液再用较低
速度离心,然后用
电子显微镜检查离心后分开的两部分结构。发现上层的囊泡表面是光滑的,沉淀下的囊泡表面有
核糖体颗粒。
通过
差速离心分离的微粒体不仅保留了膜的结构特征,同时还具有
活细胞中的
生物活性和功能。如来自
高尔基体的囊泡具有将蛋白质和脂进行
糖基化修饰的作用。用从这些囊泡中分离的特殊蛋白作为抗原制备抗体,然后将制备的抗体与特定的颗粒如金颗粒结合,再通过免疫电镜技术就能够对用作抗原的酶进行定位,通过这些研究详细揭示了高尔基体在复杂的糖装配中的具体过程。