引物设计是一小段单链DNA或RNA，在核酸合成反应时，作为每个
多核苷酸链进行延伸的出发点而起作用的多核苷酸链。
引物设计是一小段单链DNA或RNA，作为DNA复制的起始点，在核酸合成反应时，作为每个
多核苷酸链进行延伸的出发点而起作用的多核苷酸链，在引物的3′-OH上，核苷酸以二酯链形式进行合成，因此引物的3′-OH，必须是游离的。
1、长度：15—30bp，其有效长度[Ln=2(G十C)十(A十T)]一般不大于38，否则PCR的最适延伸温度会超过Taq酶的最佳
作用温度(74度)，从而降低产物的特异性。
2、G十C含量：应在40%一60%之间，PCR扩增中的复性温度一般较Tm值低等于引物的Tm值减去5—10度。引物长度小于20时，其Tm恒等于4×(G十C)十2×(A十T)。
3、
碱基分布的随机性：应避免连续出现4个以上的单一碱基。尤其是不应在其3’端出现超过3个的连续G或C，否则会使引物在G十C富集序列区错误引发。
5、引物之间：两个引物之间不应有多于4个的互补或同源碱基，不然会形成
引物二聚体，尤应避免3’端的互补重叠。