将经消毒处理过的剪成0.8-1.2厘米带叶天蓝遏蓝菜茎尖/茎节,或者或者经消毒处理过的天蓝遏蓝菜种子实生苗具芽茎段依次接种到启动
培养基中培养生成丛生芽苗;接种到增殖培养基中培养生成密集丛生芽;置入壮苗基本培养基中进行壮苗培养;转接到生根培养基中培养得生根苗;转移至荷格兰特液体培养基中进行水培壮苗培养,之后再将水培壮苗后的壮苗移栽到
苗圃基质中进行移栽定植培养,得到蓝遏蓝菜的组织;本方法不仅可以排除外界条件的影响,四季可行,节约育苗占地,降低生产成本;而且可以在短期内得到大量健壮幼苗,进行规模化、工厂化生产。
从重金属超富集植物天蓝遏蓝菜(T.caerulescens)Cd胁迫的
cDNA文库中,通过基因表达的差异筛选得到的阳性克隆之一,核苷酸序列分析表明,与拟南芥CaM2的相似性高达92%,故命名为TcCaM2(T.caerulescens CaM2,GenBank No.EF053035).其核苷酸序列与迄今已知的钙调蛋白基因同源率在83%以上;其氨基酸序列同源性高达95%以上;与大多数高等植物的CaM,如
印度芥菜、拟南芥、水稻等同源性则更高.将TcCaM2基因置于酵母表达启动子之下,构建酵母表达载体,并将其转入重金属敏感型酵母突变菌株,酵母重金属耐受性实验表明,TcCaM2在酵母中的过量表达提高了酵母对Co2+或Ni2+的耐受性,增加了对Cd2+的敏感性,对Zn2+
胁迫抗性稍有增加但差异不显著.说明TcCaM2通过其对重金属离子的结合作用及在信号转导系统中的功能,在
植物细胞对重金属的富集、耐性中发挥了重要的调节作用.