印迹技术_将待测核酸分子结合到一定固相支持物上的方法

印迹技术

将待测核酸分子结合到一定固相支持物上的方法

印迹技术是指将待测核酸分子结合到一定固相支持物上的方法。

作品概念

印迹技术是指将待测核酸分子结合到一定固相支持物上的方法。

southern印迹，将电泳分离的DNA片段转移到一定的固相支持物上的过程。

制作过程

DNA分子被限制酶切，经琼脂糖凝胶电泳，将DNA片段按照分子量大小分离，然后将含DNA片段的琼脂糖凝胶变性，将其中单链DNA转移到硝酸纤维滤膜或者其他固相支持物上。而DNA片段的相对位置保持不变。可做下一步杂交反应。

northern印迹，将RNA变性及电泳分离后，将其转移到固相支持物上的过程。

western印迹

也称Western免疫印迹（WesternBlot或WesternBlotting），是指将蛋白质样品经聚丙烯酰胺凝胶电泳分离，然后转移至到固相载体（例如硝酸纤维素薄膜）上，然后用抗体通过免疫学反应检测目的蛋白，分析基因的表达程度。能用碱变性，防止水解。用甲醛变性。

southern印迹的步骤

1从组织中提取DNA

2用特定的核酸内切酶酶切

4碱变性

5中和反应

6转膜

7固定

8杂交

9杂交信号检测

northern印迹的步骤:

1从细胞中提取总RNA

2甲醛凝胶变性电泳

3转膜

4固定

5杂交

6杂交信号检测

1蛋白质样品制备

2SDS-PAGE电泳

3转膜

4封闭

5一抗孵育

6二抗孵育

7显色

参考资料

最新修订时间：2022-06-23 15:13

条目作者

概述

作品概念

制作过程

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