分级分离，在凝胶层析中，样品中有很多组分，分子量有一定差异，但是又没有达到组别分离的要求，因此选用排阻限度略大于最高分子量组分的凝胶类型，在凝胶层析过程中这些组分都能不同程度地渗透到凝胶内部，由于分配系数Kd不同，最后在凝胶层析中可能得到分离。分级分离的目的在于使各组分的Kd差异更大。

蛋白质的分级分离