根据测量分子对特征电磁辐射的吸收,进行定性定量的一种分析方法。它可测量溶液中某一组分的浓度。生化分析仪器原理,使用仪器有
酶标仪、
分光光度计等。
1.纯粹的转动光谱只涉及分子转动能级的改变,不产生振动和电子状态的改变,转动能级间距离很小,吸收光子的波长长,频率低。两个转动能级相差10-3-10-2kcal/mol单纯的转动光谱发生在远红外和微波区。
2.振动光谱反映分子转动能级改变,分子吸收光子后产生振动能级
跃迁,在每一振动能级改变时,还伴有
能级改变,
谱线吸收带光子能量比第一种的高,两个振动能级相距为0.1-10kcal/mol,产生于波长较短,频率较高得近红外区,主要在1-30u的波长区。
3.分子吸收光子后使电子跃迁,产生电子能级的改变,即为电子光谱。引起这种改变所需的能量比前两种高,为20-300kcal/mol。电子能级的变化都伴随有振动能级与转动能级的改变。所以连个电子能级之间的跃迁不是产生单一吸收谱线,而是由很多相距不远的
谱线所组成的
吸收带。
样品在气态或
非极性溶剂中测定时,吸收带显示出由于振动和转动能级的改变而引起的复杂细微结构。在极性溶剂中,振动结构分辨能力差,甚至不能分辨,成为较宽的吸收带。