凝胶成像仪是一种用于检测和记录经过凝胶电泳分离的分子(如DNA片段)的荧光信号的设备,通过紫外线激发荧光染料,利用光学系统收集、增强和图像化荧光信号,最终通过数码相机或其他成像设备实现成像和记录。
软件介绍
应用范围
凝胶分析软件主要应用于生物医学、医药领域,为科研人员提供了分析凝胶图像及其它生物学条带的途径。
主要功能
1.凝胶图像剪辑处理,标记;
2.自动寻找凝胶条带;
3.与公用的标准条带或自选的标准条带比较;
4.条带(泳道)迁移路径的校正;
5.核酸、蛋白的处理,计算相应的分子量等数值;
6.详细的分析结果可输出成EXCEL格式,根据需要编辑。
应用范围
从整体总的来说
凝胶成像(系统)可应用于:蛋白质、核酸、多肽、氨基酸、多聚氨基酸等其他
生物分子的分离纯化结果作
定性分析
(1)分子量定量
对于一般常用的DNA胶片,利用分子量定量功能,通过对胶上DNA
Marker条带的已知分子量注释,自动生成拟合曲线,并以它衡量得到未知条带的分子量。通过这种方法所得到的结果较肉眼观察估计要准确很多。
(2)密度定量
一般常用的测定DNA(脱氧核糖核酸)和
RNA(
核糖核酸)浓度的方法是
紫外吸收法,但它只能测定样品中的总核苷酸浓度,而不能区分各个长度片段的浓度。利用
凝胶成像系统和软件,先将DNA胶片上某一已知其DNA含量的标准条带进行密度标定以后,可以方便的单击其他未知条带,根据与已知条带的密度做比较,可以得到未知DNA的含量。此方法也适用于对PA GE蛋白胶条带的浓度测定。
(3)密度扫描
在
分子生物学和生物工程研究中,我们最常用到的是对蛋白表达产物占整个
菌体蛋白的百分含量的计算。传统的方法就是利用专用的密度扫描,但利用生物分析软件结合现在实验室常规配备的扫描仪或者直接用白光照射的
凝胶成像就能完成此项工作。
(4)PCR定量
PCR定量主要是指,如果PCR实验扩增出来的条带不是一条,那么可以利用软件计算出各个条带占总体条带的相对百分数。就此功能而言,与密度扫描类似,但实际在原理上并不相同。PCR定量是对选定的几条带进行相对密度定量并计算其占总和的百分数,密度扫描时并对选择区域生成纵向扫描曲线图并积分。
凝胶成像种类
(1)
UV凝胶成像分析系统:可以对
蛋白电泳凝胶,DNA凝胶样品进行图象采集并进行定性和定量分析,样品包括:
EB、SYBR Gold、Texas Red、GelStar、Fluoroscecin、 Radiant Red等染色的
核酸监测;以及Coomassie Blue、SYPRO Orange、各种染色的蛋白质凝胶如考染等。(或UV,EB和有色及可见样品成像);
(2)
蓝光凝胶成像分析系统:SYBR Green等Green 类安全染料。以
蓝光为激发光源的
凝胶成像分析系统可取代
UV,可减少紫外对人体皮肤和双眼造成灼烧。
凝胶成像品牌
凝胶成像仪属于高科技产品,是需要软、硬件紧密一致配合的高端分子生物分析仪器。主要用于科研、医疗、教学等项目,目前国内进口品牌和国产品牌的市场占有率差不多。
进口品牌
进口品牌美国的市场上见的是相对比较多的有:
UVP、伯乐、alpha、SIM、
KODAK、GE、Wealtec等;德国品牌主要有:Royal、Raytest等;英国品牌:UVI、Fedbio等;法国品牌:VL、Vilber Lourmat等;以色列DNR;日本品牌:
富士、ATTO等;荷兰Isogen等等。目前这些国内进口品牌和国产品牌的市场占有率差不多,但是价格高于国产品牌。
国产品牌
中国本土企业也掌握了凝胶成像核心技术,性能方面不比进口差,价格又比进口的低。
成像仪特点
自动对焦(Auto Focus)凝胶成像分析系统,解决了新手在拍摄凝胶照片过成中,经常发生的被拍摄照片的亮度和对比度,焦距不准使照片不清晰的问题。
简介
自动对焦(Auto Focus)是利用物体光反射的原理,将反射的光被相机上的传感器CCD接受,通过计算机处理,带动电动对焦装置进行对焦的方式叫自动对焦.它多分为二类:一是主动式,另一个则是被动式。
分类
1、主动式自动对焦:相机CCD上的红外线发生器、
超声波发生器发出红外光或超声波到被摄体。相机CCD上的接受器接受反射回来的红外光或超声波进行对焦,其光学原理类似三角测距对焦法,广泛用于各种平视取景相机.主动式对焦对斜面,光滑面对焦困难.对亮度大,远距离的被摄体对焦困难.这是由于发出的光被反射到其它方向,或达不到被摄体所至.主动式由于是相机主动发出光或波,所以可以在低反差、弱光线下对焦.对细线条的被摄体,对动体都能自动对焦.缺点是当被摄体能吸收光或波时对焦困难,还会被玻璃反射故透过玻璃对焦困难。
2、 被动式自动对焦:即直接接收分析来自景物自身的反光,进行自动对焦的方式.这种自动对焦方式的优点是;自身不要发射系统。对具有一定亮度的被摄体能理想的自动对焦,在逆光下也能良好的对焦.对远处亮度大的物体能自动对焦。但缺点是对细线条的被摄体自动对焦较困难.在低反差,弱光下的对焦困难.对动体自动对焦能力差.对含偏光的被摄体自动对焦能力差.黑色物体或镜面的对焦能力差。 主动、被动式自动对焦方式各有千秋,好在我们首创的凝胶成像自动对焦拍摄系统上有二种自动对焦方式,可以互补使用,自动切换,发挥其强项,克服其弱点。
多种光源可选
一般的
凝胶成像系统,提供 302nmUV、254nmUV、365nmUV、蓝光及白光光源。
安全防护隔离
触摸控制电源开关、光源控制、
光圈、聚焦等观察和拍摄工作,实现污染现场和电脑操作现场隔离,防止
交叉污染,确保操作者安全,抽屉式样品
载物台,方便取放样品。
直接切胶
凝胶成像系统也可直接切胶,操作应遵循说明书的指示,尤其注意对激发光源(无论是紫外,白光或者蓝光)进行相应的防护。