此类酶的辅酶或辅基为NAD+、NADP+、FAD、FMN等。其所催化的脱氢反应最为重要，脱下的氢被其辅酶或辅基接受，生成相应的还原型辅酶或辅基如NADH+H+、NADPH+H+、FADH2、FMNH2等。其中NADH+H+、FADH2、FMNH2作为呼吸链的组成成分，NADPH+H+则在脂肪酸、胆固醇等物质的生物合成中起作用。乳酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶、琥珀酸脱氢酶等均属于这一类酶。