MEM培养基_动物细胞培养中的常用的培养基

MEM培养基

动物细胞培养中的常用的培养基

MEM培养基（Minimum Essential Medium）是动物细胞培养中的常用的培养基，主要是贴壁细胞的培养，修改配方后也可用于其他类型细胞培养，例如如无钙（Ca）MEM培养基可被用于悬浮细胞的培养，而Hank’s平衡盐的MEM培养基可被用于二倍体细胞的培养。

配方

1.配置前准备：配置培养基新制备的milli water。调节pH值的酸碱溶液也应该使用这种水配置。制备培养基的器皿清洗干净，并用milli water润洗两次。

2.溶解培养基：取5%终体积的milli water，加入到1L玻璃杯中，将干粉培养基倒入烧杯，水洗包装袋内面两次，倒入培养液中。磁力搅拌助溶。

3.补加试剂：根据包装袋说明加入NaHCO3(2.2g)，HEPES(2.383,10mmol)、非必需氨基酸(可不加，10ml)。

4.加抗生素：一般抗生素终浓度——青霉素100U/ml，链霉素100U/ml。1L加入10m储备液。

5.调pH值：加水到1000ml，然后用HCL或者NaOH调节pH到7.2。

6.过滤除菌：采用0.22um滤膜。过滤后分装于小瓶中(100或200ml)。过滤后pH值一般上升0.1-0.3。

7.加小牛血清：根据培养基配置的量将小牛血清分装，冷冻保存(-20度)。临用前将加入小牛血清10%。

使用说明

1、保存在2-8度干燥环境，避光。

2、称量出比最终容积小5%的蒸馏水，混合的容器尽可能接近最终容积。

3、将干粉加入到室温15到30度的水中，轻柔搅拌，勿用热水。

4、冲洗出包装袋内所有干粉。

5、每升培养基加入2.2g碳酸氢钠。

6、用水稀释至最终的容积，搅拌直至溶解。不要过分混合。

7、调整pH值比最后的培养用的pH值要低0.2到0.3(过滤后pH值一般要升高0.1 到0.3)：用1N NaOH 和 1N HCl，边搅拌边缓慢添加。调整pH值完毕后，封闭容器，直至过滤。

8、立即用膜滤过消毒。

参考资料

最新修订时间：2023-09-27 22:57

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