ECL
增强型化学发光试剂
ECL(enhanced chemiluminescence)是指一种具有较高的化学发光强度的试剂。
释义
ECL在化学领域,是一种化学发光试剂。enhanced chemiluminescence
化学发光试剂,
一般是WesternBlot的最后一步,加入1:1的溶液A和溶液B,覆盖pvdf膜,可以显色来观察实验结果。
原理
一般使用的发光液A和B分别是
鲁米诺
和
过氧化氢
,在
辣根过氧化物酶
(HRP)的催化作用下,鲁米诺与过氧化氢反应生成一种过氧化物,过氧化物不稳定随即分解,形成一种能发光的电子激发中间体,当后者由激发态返回至基态,就会产生荧光。
在发光过程中不需要消耗HRP,HRP只是起催化作用,所以只要HRP没降解失活,是可以重复加发光液的。但HRP作为一种蛋白酶,在室温放置时间过长,是会降解的;同时在发光过程中有什么物质(比如显影液)污染了膜的话,也有可能灭活膜上的HRP。
参考资料
最新修订时间:2023-06-26 00:25
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