amv逆转录酶分离自禽类成髓细胞瘤病毒,其方法由houts等人的方法改进而来。分离得到的酶是分子量为157kd的αβ全酶。amv逆转录酶经高度纯化,完全无核酸酶
污染。amv逆转录酶可用于
cdna合成,也可用于
rna和
dna的双脱氧测序。amv逆转录酶以总rnd或
polya+rnd为
模板,具有以rna为模板的dna
聚合酶活性,dna为模板的dna聚合酶活性和rnaseh酶活性,最适反应温度在42-55℃,最高可达60℃,如果使用
焦磷酸钠,最适温度为37-41℃。rtt反应缓冲液根据不同用途可以作为5x或10x反应液使用,同时可抑制rnaseh酶活性。按照标准使用方法可以得到长至10-12kbcdna。rt007amv逆转录酶比普通amv逆转录酶和
mmlv逆转录酶能耐受更高的温度和合成更长的cdna。
1.1μg helatotalrna在42℃,50℃,55℃,60℃经amv酶逆转录后进行pcr的产物
电泳结果2、1μg helatotalrna经amv酶逆转录后扩增不同长度pcr产物的电泳结果,amv酶可以转录长至9.6kb的mrna